Thermo Fisher Scientific VetMAX Schmallenberg Virus Kit Mode d'emploi

Marque: Thermo Fisher Scientific

Modèle: VetMAX Schmallenberg Virus Kit

Taper: Mode d'emploi

VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

Protocoles de puriﬁcation d’acides nucléiques optimisés pour une utilisation avec le kit (Réf. SBVS50)

Pub. nº MAN0008246 Rév. D.0

Espèces Matrices d’échantillons Type de test

• Bovins

• Petits ruminants (ovins, caprins)

• Sang total en tubes EDTA

•Sérum

• Tissu cérébral

Individuel

AVERTISSEMENT ! Lire les ﬁches de données de sécurité (FDS) et suivre les consignes de manipulation. Porter des lunettes

de protection, des gants et des vêtements appropriés. Les ﬁches de données de sécurité (FDS) sont disponibles à l’adresse

thermoﬁsher.com/support.

AVERTISSEMENT ! RISQUE BIOLOGIQUE. Lire les informations de sécurité relatives aux risques biologiques du produit

disponibles sur thermoﬁsher.com. Suivre toutes les réglementations du travail avec des échantillons biologiques locales,

nationales et/ou communautaires en vigueur.

■Objectif de ce guide ....................................................................................... 2

■Choix de l’échantillon ...................................................................................... 2

■Conservation des échantillons ............................................................................... 2

■Matériels requis non fournis ................................................................................. 2

■Protocoles de puriﬁcation d’ARN recommandés ................................................................. 4

■Instructions .............................................................................................. 5

■Préparation des échantillons pour la puriﬁcation (toutes les méthodes) ................................................ 5

■Puriﬁcation de l’acide nucléique avec le MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit (méthode automatisée) ................ 6

■Puriﬁcation de l’acide nucléique avec le MagVet™ Universal Isolation Kit (méthode automatisée) ........................... 10

■Puriﬁcation de l’ARN avec le MagMAX™-96 Viral RNA Isolation Kit (méthode automatisée) ............................... 11

■Puriﬁcation de l’ARN avec le QIAamp™ Viral RNA Mini Kit (méthode manuelle) ......................................... 13

■Puriﬁcation de l’ARN avec le kit NucleoSpin™ RNA Virus (méthode manuelle) .......................................... 14

■Puriﬁcation de l’ARN avec le kit NucleoSpin™ 8 Virus/NucleoSpin™ 96 Virus (méthode manuelle) ........................... 15

■Bonnes pratiques de laboratoire pour la PCR et la RT-PCR ........................................................ 16

Annexe A Puriﬁcation avec l’instrument KingFisher™ Duo Prime ou KingFisher™ mL

■Matériels requis non fournis ................................................................................ 17

■Procédure de puriﬁcation .................................................................................. 17

Annexe B Documentation et support

■Assistance à la clientèle et support technique .................................................................. 18

■Garantie limitée du produit ................................................................................. 19

GUIDE COMPLÉMENTAIRE

Pour usage en laboratoire.

Objectif de ce guide

Ce guide décrit les protocoles de puriﬁcation d’ARN du virus de Schmallenberg validés et optimisés pour une utilisation en aval avec

Applied Biosystems™ VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit (Réf. SBVS50).

• La puriﬁcation automatisée des acides nucléiques est réalisée à l’aide de l’un des instruments suivants : KingFisher™ Flex, MagMAX™

Express-96, KingFisher™ mL ou KingFisher™ Duo Prime.

• La puriﬁcation manuelle d’acides nucléiques utilise des colonnes ou des plaques de centrifugation à base de silice.

Choix de l’échantillon

Type d’échantillon Type d’analyse Quantité requise et équipement de prélèvement

Sang total Individuel 50 à 200 μl de sang total prélevé dans des tubes EDTA[1]

Sérum Individuel 50 à 200 μl de sérum prélevé dans des tubes secs[1]

Tissu Individuel 100 mg de tissu cérébral

[1] Le volume nécessaire dépend du protocole de purification utilisé.

Conservation des échantillons

Type d’échantillon Conservation

Sang total Après le prélèvement, conserver les échantillons entre 2°C et 8°C jusqu’à utilisation (sous 4 jours maximum).

Après utilisation ou à expiration du délai de 4 jours, conserver les échantillons en dessous de -16°C pour une utilisation dans

l’année ou en dessous de -70°C pour une conservation à long terme.

Sérum

Tissu (cerveau) Après prélèvement, conserver comme indiqué :

• conserver les échantillons entre 2°C et 8°C si l’analyse est eectuée dans les 24 heures suivant le prélèvement ;

• conserver les échantillons en dessous de -16°C si l’analyse est eectuée au-delà des 24 heures suivant le prélèvement.

Après utilisation ou à expiration du délai de 24 heures, conserver les échantillons en dessous de -16°C pour une utilisation

dans l’année ou en dessous de -70°C pour une conservation à long terme.

Matériels requis non fournis

Sauf indication contraire, tous les produits sont disponibles sur thermoﬁsher.com. « PFL » indique que le matériel est disponible sur

ﬁsherscientiﬁc.com ou auprès d'un autre grand fournisseur de laboratoire.

Matériel nécessaire pour la collecte d’échantillon, la préparation, et la puriﬁcation des acides nucléiques

Tableau 1 Matériel requis pour toutes les méthodes de préparation des échantillons

Élément Source

Équipement

Poste de Sécurité Microbiologique de type II (PSMII) PFL

Centrifugeuse de paillasse PFL

Agitateur de laboratoire, vortex ou équivalent PFL

Micropipettes de précision ajustables (de 1 µl à 1 000 µl) PFL

Consommables

Embouts de pipette résistant aux aérosols, sans nucléase PFL

Microtubes exempts de DNase/RNase de 1,5 ml et 2,0 ml PFL

Réactifs

Eau sans nucléase AM9932

PBS (1X), pH 7.4 PFL

2Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

Tableau 2 Matériel supplémentaire nécessaire pour la puriﬁcation à partir d’échantillons de tissu

Élément Source

Équipement

Broyeur de tissus pour agitation avec billes, parmi les modèles suivants ou équivalents :

• Fisher Scientiﬁc™ Bead Mill 24 Homogenizer

• Precellys™ 24 Homogenizer (Bertin)

• Instrument FastPrep‑24™ (MP Biomedical 116004500)

• Mixer Mill 400 (Verder 207450001)

•Fisher Scientiﬁc 15-340-163

• Bertin EQ03119.200.RD000.0

• Fisher Scientiﬁc MP116004500

• Fisher Scientiﬁc 08 418 241

Balance de précision PFL

PYREX™ Solid Glass Beads for Distillation Columns (3 mm), ou billes en verre de 3 mm équivalentes Fisher Scientiﬁc™ 11-312-10A

Scalpels et pinces métalliques (stériles) PFL

Consommables

Boîte de Petri (stérile) PFL

Matériels supplémentaires nécessaires pour la puriﬁcation automatisée des acides nucléiques

Tableau 3 Matériel nécessaire pour la procédure MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit

Élément Source

Instrument, l’un des suivants :

KingFisher™ Flex Puriﬁcation System

Contacter votre représentant commercial

local.

MagMAX™ Express‑96 Magnetic Particle Processor

KingFisher™ Duo Prime Puriﬁcation System

KingFisher™ mL Puriﬁcation System

Équipement

Réservoir de réactifs PFL

Consommables

Adhesive PCR Plate Foils, ou équivalent AB0626

Consommables pour les instruments KingFisher™ Flex et MagMAX™ Express-96 :

• KingFisher™ Deep-Well 96 Plate

• KingFisher™ 96 KF microplates

• KingFisher™ 96 tip comb for DW magnets

• 95040450

•97002540

• 97002534

Consommables pour les instruments KingFisher™ Duo Prime et KingFisher™ mL Voir Tableau 9 en page 17.

Kits et réactifs

MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit A32700 ou A32702

PBS, pH 7.4 (10X), exempt de RNase AM9624

Tableau 4 Matériel nécessaire pour la procédure MagVet™ Universal Isolation Kit

Élément Source

Instrument, l’un des suivants :

KingFisher™ Flex Puriﬁcation System

Contacter votre représentant commercial

local.

MagMAX™ Express‑96 Magnetic Particle Processor

KingFisher™ mL Puriﬁcation System

Équipement

Réservoir de réactifs PFL

Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit 3

Élément Source

Kits et réactifs

MagVet™ Universal Isolation Kit MV384

Éthanol à 80 % PFL

Tableau 5 Matériel nécessaire pour la procédure MagMAX™-96 Viral RNA Isolation Kit

Élément Source

Instrument

MagMAX™ Express‑96 Magnetic Particle Processor Contacter votre représentant commercial

local.

Équipement

Réservoir de réactifs PFL

Kits et réactifs

MagMAX™-96 Viral RNA Isolation Kit AM1836

Éthanol à 96-100 % PFL

Isopropanol à 100 % PFL

Matériels supplémentaires nécessaires pour la puriﬁcation manuelle des acides nucléiques

Élément Source

Équipement

Bloc chauant à 70℃PFL

Kits et réactifs

L’un des kits suivants :

• QIAamp™ Viral RNA Mini Kit

• NucleoSpin™ RNA Virus Kit

• NucleoSpin™ 96 Virus Kit

• NucleoSpin™ 8 Virus Kit

• Qiagen 52904

•Macherey Nagel 740956

• Macherey Nagel 740691.4

• Macherey Nagel 740643

Éthanol à 96-100 % PFL

Protocoles de puriﬁcation d’ARN recommandés

Protocole de puriﬁcation Type d’échantillon

Sang total Sérum Tissu (cerveau)

Méthodes automatisées

MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit (page 6) ✓— —

MagVet™ Universal Isolation Kit (page 10) ✓✓✓

MagMAX™-96 Viral RNA Isolation Kit (page 11) ✓✓✓

Méthodes manuelles

QIAamp™ Viral RNA Mini Kit (page 13) ✓✓✓

Kit NucleoSpin™ RNA Virus (page 14) ✓✓✓

Kit NucleoSpin™ 8 Virus/NucleoSpin™ 96 Virus (page 15) ✓✓✓

4Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

Instructions

Préparer au moins un échantillon témoin puriﬁé à utiliser en tant que contrôle négatif d’extraction. Utiliser du PBS (1X), pH 7.4 ou de

l’eau sans nucléase au lieu de l’échantillon testé, sauf indication contraire. Traiter l’échantillon témoin puriﬁé en même temps que les

échantillons testés, en utilisant le même protocole de puriﬁcation d’acides nucléiques.

Préparation des échantillons pour la puriﬁcation (toutes les méthodes)

1. Préparer les échantillons comme décrit.

Type d’échantillon Action

• Sang total

• Sérum

Procéder avec 50–200 μl d’échantillon, selon le protocole de puriﬁcation utilisé.

Tissu 1. Hacher ﬁnement le morceau de tissu dans une boîte de Petri stérile à l’aide de pinces et d’un scalpel

stériles.

2. Ajouter les composants suivants dans un tube de 2 ml :

• tissu : 100 mg ;

• PBS (1X), pH 7.4 : 1 ml ;

• PYREX™ Solid Glass Beads for Distillation Columns (3 mm) : 2 billes

3. Broyer (agiter avec les billes) les échantillons.

• Precellys™ 24 Homogenizer : 6 000 rpm pendant 40 secondes

• FastPrep‑24™ Instrument : 6 m/s pendant 45 secondes

• Mixer Mill 400 : 30 Hz pendant 2 minutes

4. Centrifuger à 6 000 × g pendant 2 minutes.

5. Procéder avec 50-100 μl de surnageant, selon le protocole de puriﬁcation utilisé.

2. Procéder à la puriﬁcation d’ARN avec le volume approprié de l’échantillon préparé.

•“Puriﬁcation de l’acide nucléique avec le MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit (méthode automatisée)” en page 6

•“Puriﬁcation de l’acide nucléique avec le MagVet™ Universal Isolation Kit (méthode automatisée)” en page 10

•“Puriﬁcation de l’ARN avec le MagMAX™-96 Viral RNA Isolation Kit (méthode automatisée)” en page 11

•“Puriﬁcation de l’ARN avec le QIAamp™ Viral RNA Mini Kit (méthode manuelle)” en page 13

•“Puriﬁcation de l’ARN avec le kit NucleoSpin™ RNA Virus (méthode manuelle)” en page 14

•“Puriﬁcation de l’ARN avec le kit NucleoSpin™ 8 Virus/NucleoSpin™ 96 Virus (méthode manuelle)” en page 15

Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit 5

Puriﬁcation de l’acide nucléique avec le MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit (méthode

automatisée)

Cette procédure est destinée à la puriﬁcation rapide d’ARN viral à partir d’échantillons de sang total dans des tubes EDTA.

Suivre cette procédure si les instruments suivants sont utilisés :

• KingFisher™ Flex

• MagMAX™ Express-96

Suivre l’Annexe A, “Puriﬁcation avec l’instrument KingFisher™ Duo Prime ou KingFisher™ mL” si les instruments suivants sont utilisés :

• KingFisher™ Duo Prime

• KingFisher™ mL

Méthodes recommandées

Deux méthodes sont disponibles pour l’extraction d’échantillons de sang total avec le MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit :

•Méthode Multi-échantillons Simple—Recommandée pour traiter une combinaison de types d’échantillons.

•Méthode Simple—Recommandée pour traiter uniquement les échantillons de sang total.

Remarque :

·Un script express est disponible pour traiter les échantillons sur l’instrument (voir “Téléchargement et installation du script” en

page 7).

·Les scripts express ont été validés avec le proﬁl thermique express uniquement (voir VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit Notice

d’utilisation [Pub. N° MAN0007811]).

Méthode : Multi-échantillons Simple

Méthode Multi-échantillons Simple

Préparation des plaques pour le traitement

Préparation du mélange de Lysis/Binding/Bead

Mélanger les échantillons avec la PK, puis ajouter le mélange de Lysis/ Binding/ Bead

Placement des échantillons dans l’instrument

Méthode : Simple

Méthode Simple

Préparation des plaques pour le traitement

Préparation du mélange Bead/PK

Préparation de la solution de Lysis/Binding

Mélange des échantillons avec le mélange Bead/PK et la solution de Lysis/Binding

Placement des échantillons dans l’instrument

6Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

Instructions

• Avant utilisation, retourner les bouteilles de solutions et de tampons pour bien les mélanger.

• Mélanger les échantillons avec les réactifs en utilisant un agitateur de plaques ou par aspiration-refoulement.

Remarque : Ne pas utiliser d’agitateur de plaques avec les barrettes requises par l’instrument KingFisher™ mL.

• Pour éviter toute contamination croisée :

– Couvrir la plaque ou la barrette pendant les étapes d’incubation et d’agitation, pour éviter tout débordement.

– Pipeter avec précaution les réactifs et les échantillons pour éviter les éclaboussures.

• Pour éviter toute contamination par les nucléases :

– Porter des gants de laboratoire pendant les procédures. Les gants vous protègent des réactifs, et ils protègent l’acide nucléique

des nucléases présents sur la peau.

– Utiliser des embouts de pipettes exempts d’acide nucléique pour manipuler les réactifs, et éviter de mettre des embouts utilisés

dans les récipients de réactifs.

– Décontaminer les paillasses de laboratoire et les pipettes avant de commencer.

Avant la première utilisation du kit

Déterminer le réglage maximal de l’agitateur de plaques

Si un agitateur de plaques est utilisé, déterminer le réglage maximal.

1. Vériﬁer que la plaque est bien ﬁxée sur l’agitateur.

2. Ajouter 1 ml d’eau dans chaque puits de la plaque, puis couvrir avec une feuille adhésive.

3. Déterminer le réglage maximal que vous pouvez utiliser avec votre agitateur sans que l’eau éclabousse la feuille adhésive.

Téléchargement et installation du script

Le script adéquat pour MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit doit être installé sur l’instrument avant sa première utilisation.

1. Sur la page internet du produit MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit (à l’adresse thermoﬁsher.com, eectuer une

recherche à partir de la référence), faire déﬁler jusqu’à la section Documentation du produit.

2. Faire un clic droit sur le ﬁchier approprié pour télécharger la version la plus récente du script MagMAX_CORE pour votre instrument.

Tableau 6 Scripts recommandés

Instrument Nom du script

Script standard Script express

KingFisher™ FlexMagMAX_CORE_Flex.bdz MagMAX_CORE_Flex_Express.bdz

KingFisher™ 96

MagMAX™ Express-96 MagMAX_CORE_KF-96.bdz MMC_KF96_Express.kf2

KingFisher™ Duo Prime MagMAX_CORE_DUO.bdz MagMAX_CORE_DUO_Express.bdz

KingFisher™ mL MagMAX_CORE_mL_no_heat.bdz MagMAX_CORE_mL_Express.bdz

Si requis par votre laboratoire, utiliser l’un des scripts suivants, qui ne chaue pas le liquide lors de l’étape d’élution.

Tableau 7 Scripts alternatifs sans étape d’élution chauée

Instrument Nom du script

KingFisher™ FlexMagMAX_CORE_Flex_no_heat.bdz

KingFisher™ 96

MagMAX™ Express-96 MagMAX_CORE_KF-96_no_heat.bdz

KingFisher™ Duo Prime MagMAX_CORE_DUO_no_heat.bdz

KingFisher™ mL MagMAX_CORE_mL_no_heat.bdz

3. Se référer au guide de l’utilisateur de l’instrument ou contacter l’assistance technique pour connaître les instructions d’installation du

script.

Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit 7

Préparation des plaques pour le traitement

1. Préparation des plaques pour le traitement.

Tableau 8 Conﬁguration de la plaque : Instrument KingFisher™ Flex ou MagMAX™ Express-96

ID de la plaque Position de la

plaque[1] Type de plaque Réactif Volume par puits

Plaque de lavage 1 2 Deep Well MagMAX™ CORE Wash Solution 1 500 µl

Plaque de lavage 2 3 Deep Well MagMAX™ CORE Wash Solution 2 500 µl

Élution 4 Standard MagMAX™ CORE Elution Buer 90 µl

Peigne 5 Standard Placer un peigne protecteur dans la plaque.

[1] Position sur l’instrument.

Remarque : Pour conﬁgurer les plaques ou les barrettes de tubes pour l’instrument KingFisher™ Duo Prime ou KingFisher™ mL, voir

Annexe A, “Puriﬁcation avec l’instrument KingFisher™ Duo Prime ou KingFisher™ mL”.

2. (Facultatif) Pour éviter l’évaporation et la contamination, couvrir les plaques préparées avec une feuille adhésive jusqu’à ce qu’elles

soient chargées dans l’instrument.

3. Procéder avec la méthode adaptée à votre laboratoire.

•Méthode Multi-échantillons Simple —Voir “Méthode Multi-échantillons Simple : Préparation des échantillons pour le

traitement” en page 8.

•Méthode Simple —Voir “Méthode Simple : Préparation des échantillons pour le traitement” en page 9.

Méthode Multi-échantillons Simple : Préparation des échantillons pour le traitement

a. Vortexer vigoureusement les MagMAX™ CORE Magnetic Beads pour s’assurer que les billes sont

complètement resuspendues.

b. Mélanger les composants suivants pour le nombre requis d’échantillons plus 10 % d’excédent.

Composant Volume par échantillon

MagMAX™ CORE Lysis Solution 350 µl

MagMAX™ CORE Binding Solution 350 µl

MagMAX™ CORE Magnetic Beads 20 μl

Mélange de Lysis/Binding/Bead total 720 µl

c. Homogénéiser en retournant le tube ou la bouteille au moins 10 fois.

1Préparation du mélange

de Lysis/Binding/Bead

a. Ajouter 10 µl de MagMAX™ CORE Proteinase K dans les puits appropriés de la plaque ou de la

barrette de tubes d’échantillons.

b. Transférer 200 µl de chaque échantillon de sang total dans un puits ou un tube contenant le

MagMAX™ CORE Proteinase K.

c. Mélanger l’échantillon avec la protéinase K pendant 2 minutes à température ambiante selon la

méthode de votre choix.

•Utilisation d’un agitateur de plaques : agiter vigoureusement pendant 2 minutes (voir

“Déterminer le réglage maximal de l’agitateur de plaques” en page 7).

•Par pipetage : homogénéiser par plusieurs aspiration-refoulement, puis incuber 2 minutes

à température ambiante. (Pour le traitement en aval sur l’instrument KingFisher™ mL, vous

devez mélanger en pipetant.)

2Mélanger les échantillons

avec la PK, puis ajouter le

mélange de Lysis/ Binding/

Bead

8Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

2Mélanger les

échantillons avec la

PK, puis ajouter le

mélange de Lysis/

Binding/ Bead (suite)

d. Retourner le tube contenant le mélange de Lysis/Binding/Bead plusieurs fois pour resuspendre

les billes, puis ajouter 720 µl de mélange de Lysis/Binding/Bead à chaque échantillon.

e. Passer immédiatement à “Placement des échantillons dans l’instrument” en page 9.

Méthode Simple : Préparation des échantillons pour le traitement

Préparer un nouveau mélange Bead/PK pour chaque test.

a. Vortexer vigoureusement les MagMAX™ CORE Magnetic Beads pour s’assurer que les billes sont

complètement resuspendues.

b. Mélanger les composants suivants pour le nombre requis d’échantillons plus 10 % d’excédent.

Composant Volume par échantillon

MagMAX™ CORE Magnetic Beads 20 µl

MagMAX™ CORE Proteinase K 10 µl

Mélange Bead/PK total 30 µl

(Facultatif) Conserver le mélange Bead/PK à 4°C pendant un maximum de 1 semaine.

1Préparation du mélange

Bead/PK

a. Mélanger les composants suivants pour le nombre requis d’échantillons plus 10 % d’excédent.

Composant Volume par échantillon

MagMAX™ CORE Lysis Solution 350 µl

MagMAX™ CORE Binding Solution 350 µl

Solution de Lysis/Binding totale 700 µl

b. Retourner le tube ou la bouteille au moins 10 fois pour mélanger.

2Préparation de la solution

de Lysis/Binding

a. Retourner plusieurs fois le tube de mélange Bead/PK pour resuspendre les billes, puis ajouter

30 µl de mélange Bead/PK dans les puits appropriés de la plaque d’échantillon ou de la barrette

de tubes.

b. Transférer 200 µl de chaque échantillon de sang total dans un puits ou un tube contenant le

mélange Bead/PK.

c. Mélanger l’échantillon avec le mélange Bead/PK pendant 2 minutes à température ambiante

selon la méthode de votre choix.

•Utilisation d’un agitateur de plaques : agiter vigoureusement pendant 2 minutes (voir

“Déterminer le réglage maximal de l’agitateur de plaques” en page 7).

•Par pipetage : homogénéiser par plusieurs aspiration-refoulement, puis incuber 2 minutes

à température ambiante. (Pour le traitement en aval sur l’instrument KingFisher™ mL, vous

devez mélanger en pipetant.)

d. Ajouter 700 µl de solution de Lysis/Binding dans chaque puits ou tube contenant un échantillon.

e. Passer immédiatement à “Placement des échantillons dans l’instrument” en page 9.

3Mélange des échantillons

avec le mélange Bead/PK

et la solution de

Lysis/Binding

Placement des échantillons dans l’instrument

1. Sélectionner le script approprié sur l’instrument (voir “Téléchargement et installation du script” en page 7).

Remarque : Pour un traitement rapide des échantillons, sélectionner l’un des scripts express suivants sur l’instrument.

·KingFisher™ Flex : MagMAX_CORE_Flex_Express.bdz

Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit 9

·KingFisher™ 96/MagMAX™ Express-96 : MMC_KF96_Express.kf2

2. Démarrer le test, puis charger les plaques préparées dans la position appropriée lorsque l’instrument vous invite à le faire.

• Conserver l’acide nucléique puriﬁé sur glace pour une utilisation immédiate, à -20°C pendant 1 mois maximum, ou à -80°C pour une

conservation à long terme.

• Pour les échantillons traités avec un script express, réaliser une RT-PCR temps réel avec le proﬁl thermique express (voir VetMAX™

Schmallenberg Virus Kit Notice d’utilisation [Pub. N° MAN0007811]).

Puriﬁcation de l’acide nucléique avec le MagVet™ Universal Isolation Kit (méthode automatisée)

Le protocole suivant peut être utilisé avec les instruments KingFisher™ Flex, KingFisher™ mL et MagMAX™ Express-96.

Avant la première utilisation du kit

• Préparation du tampon de lyse NM1 Buer : ajouter 100 ml de tampon N1 Buer dans la bouteille contenant le tampon M1 Buer

(25 ml), puis vortexer pour bien mélanger.

Conserver le tampon de lyse NM1 Buer à température ambiante jusqu’à 1 an.

Avant chaque utilisation du kit

Préparation du mélange NM2+Beads : mélanger les composants suivants pour le nombre requis d’échantillons, plus 5 à 10 %

d’excédent, puis vortexer pour mélanger soigneusement.

Composant Volume par échantillon

Solution de binding NM2 600 µl

NM_LSI_Beads 20 µl

Jeter le mélange NM2+Beads après utilisation.

Réalisation de la procédure de puriﬁcation

Ajouter les composants suivants dans les puits appropriés de la plaque d’échantillon ou de la barrette

de tubes.

Composant Volume par échantillon testé Volume par échantillon témoin puriﬁé

Échantillon préparé • 100 µl de sang total ou de sérum

• 100 µl de surnageant de tissu —

NM1 Lysis Buer 250 µl 250 µl

1Lyse des échantillons

Préparer les plaques ou barrettes de tubes pour le traitement à l’extérieur de l’instrument comme

décrit dans le tableau suivant.

Position[1] Type de plaque[2] Réactif Volume par puits

2 Deep Well NM3 Wash Buer 600 µl

3 Deep Well NM4 Wash Buer 600 µl

4 Deep Well Éthanol à 80 % 600 µl

5 Standard NM6 Elution Buer 80 µl

6 Deep Well Placer un peigne protecteur dans la plaque ou la

barrette de tubes.

[1] Position sur l’instrument.

[2] Non applicable en cas d’utilisation de barrettes de tubes.

2Préparation des plaques

ou barrettes de tubes

pour le traitement

10 Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

a. Vortexer vigoureusement le mélange NM2+Beads pour s’assurer que les billes sont

complètement resuspendues.

b. Ajouter 620 µl de mélange NM2+Beads à chaque échantillon et témoin.

c. Sélectionner le script approprié sur l’instrument.

• KingFisher™ Flex/MagMAX™ Express-96 : NM_LSI_RRC96

• KingFisher™ mL : NM_LSI_15prep

d. Démarrer le test, puis charger les plaques préparées dans la position appropriée lorsque

l’instrument vous invite à le faire.

Charger la plaque d’échantillons ou la barrette de tubes à la position 1 sur l’instrument.

Remarque : Si vous utilisez l’instrument KingFisher™ mL, charger le peigne et toutes les

barrettes de tubes en même temps. L’instrument ne vous invite pas à charger les éléments

individuellement.

e. À la ﬁn du test, lorsque l’instrument le demande, retirer la plaque ou les tubes contenant l’acide

nucléique puriﬁé.

Instrument Procédure

• KingFisher™ Flex

• MagMAX™ Express-96

Enlever la plaque en position 5 puis couvrir d’un ﬁlm adhésif.

KingFisher™ mL Enlever la barrette de tubes et transférer l’acide nucléique puriﬁé en

position 5 dans de nouveaux tubes de microcentrifugeuse.

Conserver les acides nucléiques puriﬁés entre 2°C et 8°C pour une utilisation immédiate ou en

dessous de -16°C pour une conservation à long terme.

3Placement des

échantillons dans

l’instrument

Puriﬁcation de l’ARN avec le MagMAX™-96 Viral RNA Isolation Kit (méthode automatisée)

Ce protocole peut être utilisé avec les instruments MagMAX™ Express-96.

Avant la première utilisation du kit

Préparer la solution de lavage 1 et la solution de lavage 2—Ajouter la quantité requise d’éthanol à 100 % au ﬂacon du concentré de

solution de lavage 2 selon les recommandations du fournisseur.

Procédure de puriﬁcation

a. Mélanger les composants suivants pour le nombre requis d’échantillons plus 10 % d’excédent,

puis vortexer brièvement pour mélanger.

Remarque : Le Carrier RNA peut prendre un aspect visqueux une fois décongelé. Si besoin,

réchauer la solution à 37°C pendant 10–15 minutes, vortexer vigoureusement, puis centrifuger

avant de pipeter.

Composant Volume par échantillon

Concentré de solution de Lysis/Binding 70 μl

Carrier RNA 1 μl

Concentré de solution de Lysis/Binding + Carrier RNA total 71 μl

1Préparation de la solution

de Lysis/Binding

Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit 11

1Préparation de

la solution de

Lysis/Binding (suite)

b. Ajouter de l’isopropanol à 100 % au mélange Concentré de solution de Lysis/Binding + Carrier

RNA, puis vortexer vigoureusement pour mélanger.

Composant Volume par échantillon

Concentré de solution de Lysis/Binding + Carrier RNA 71 μl

Isopropanol à 100 % 70 μl

Solution de Lysis/Binding totale 141 μl

c. Garder la solution de Lysis/Binding à température ambiante jusqu’à son utilisation.

Préparer le mélange Bead au moment de l’utilisation. Ne pas mélanger à l’avance.

a. Vortexer soigneusement les RNA Binding Beads pour s’assurer que les billes sont complètement

resuspendues.

b. Mélanger les composants suivants pour le nombre requis d’échantillons plus 10 % d’excédent.

Composant Volume par échantillon

RNA Binding Beads 10 µl

Lysis/Binding Enhancer 10 µl

Mélange Bead total 20 µl

c. Homogénéiser le mélange Bead par inversion jusqu’à obtenir une solution homogène, puis

placer sur glace jusqu’au moment de l’utilisation.

Éliminer le mélange Bead après utilisation.

2Préparation du mélange

Bead

Ajouter les composants suivants dans les puits appropriés de la plaque d’échantillon (plaque deep

well).

Composant Volume par échantillon testé Volume par échantillon témoin puriﬁé

Échantillon préparé • 50 µl de sang total ou de sérum

• 50 µl de surnageant de tissu —

Mélange Bead 20 µl 20 µl

3Mélanger les échantillons

avec le mélange Bead

Préparer les plaques à l’extérieur de l’instrument comme décrit dans le tableau suivant.

Position[1] Type de plaque Réactif Volume par puits

2 Standard Wash Solution 1 170 µl

3 Standard Wash Solution 1 170 µl

4 Standard Wash Solution 2 170 µl

5 Standard Wash Solution 2 170 µl

6 Standard Elution Buer 50 µl

7 Standard Placer un peigne protecteur dans la plaque.

[1] Position sur l’instrument.

4Préparation des plaques

ou barrettes de tubes

pour le traitement

a. Ajouter 140 µl de solution de Lysis/Binding à chaque échantillon et contrôle.

b. Sélectionner le script AM_LSI_Express sur l’instrument :

5Traitement des

échantillons sur

l’instrument

12 Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

5Traitement des

échantillons sur

l’instrument (suite)

c. Démarrer le test, puis charger les plaques préparées dans la position appropriée lorsque

l’instrument vous invite à le faire.

Charger la plaque d’échantillons ou la barrette de tubes à la position 1 sur l’instrument.

d. À la ﬁn du test, lorsque l’instrument le demande, retirer la plaque à la position 6, puis transférer

l’ARN puriﬁé dans la plaque de conservation des éluats (fournie dans le kit) ou dans de nouvelles

centrifugeuses de paillasse.

Conserver l’ARN entre 2°C et 8°C pour une utilisation immédiate ou en dessous de -16°C pour une

conservation à long terme.

Puriﬁcation de l’ARN avec le QIAamp™ Viral RNA Mini Kit (méthode manuelle)

Avant la première utilisation du kit

• Reconstitution du tampon AVL+Carrier : à réaliser selon les recommandations du fournisseur.

• Reconstitution des tampons AW1 et AW2 : ajouter le volume requis d’éthanol à 96–100 % selon les recommandations du

fournisseur.

Réalisation de la procédure de puriﬁcation

a. Mélanger les composants suivants dans l’ordre indiqué, puis passer immédiatement à l’étape

suivante.

Composant Volume par échantillon testé Volume par échantillon témoin

puriﬁé

Échantillon préparé

• 100 µl de sang total ou de

sérum

•100 µl de surnageant de tissu

—

Eau sans nucléase — 100 µl

AVL+Carrier Buer 560 µl 560 µl

b. Vortexer pendant 15 secondes.

c. Incuber à température ambiante pendant 10 minutes.

d. Ajouter 560 µl d’éthanol à 96–100 % sur chaque échantillon, vortexer pendant 15 secondes, puis

centrifuger rapidement pour prélever le contenu.

1Lyse et homogénéisation

des échantillons

a. Insérer une colonne de QIAamp™ Viral RNA Mini Kit dans un tube collecteur, puis transférer

630 μl de l’échantillon sur la colonne.

b. Boucher la colonne, puis centrifuger l’ensemble à 10 000 × g pendant 1 minute.

c. Jeter le tube collecteur puis positionner la colonne sur un nouveau tube collecteur.

d. Transférer le volume restant de l’échantillon sur la colonne, boucher la colonne, puis centrifuger

à 10 000 × g pendant 1 minute.

e. Jeter le tube collecteur, puis positionner la colonne sur un nouveau tube collecteur.

2Liaison de l’ARN à la

colonne

Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit 13

a. Ajouter 500 μl de tampon AW1 Buer à chaque colonne, boucher la colonne, puis centrifuger à

10 000 × g pendant 1 minute.

b. Jeter le tube collecteur puis positionner la colonne sur un nouveau tube collecteur.

c. Ajouter 500 μl de tampon AW2 Buer à chaque colonne, boucher la colonne, puis centrifuger à

10 000 × g pendant 1 minute.

d. Jeter le tube collecteur puis positionner la colonne sur un nouveau tube collecteur.

e. Centrifuger à 10 000 × g pendant 3 minutes pour sécher la membrane.

f. Jeter le tube collecteur.

g. Placer la colonne sur un nouveau microtube de 1,5 ml, puis ajouter 40 µl de tampon AVE.

h. Boucher la colonne, puis incuber à température ambiante pendant 1 minute.

i. Centrifuger à 6 000 × g pendant 2 minutes, puis jeter la colonne.

L’ARN puriﬁé se trouve dans le microtube.

Conserver l’ARN puriﬁé entre 2°C et 8°C pour une utilisation immédiate ou en dessous de ‑16°C pour

une conservation à long terme.

3Lavage, puis élution de

l’ARN

Puriﬁcation de l’ARN avec le kit NucleoSpin™ RNA Virus (méthode manuelle)

Avant la première utilisation du kit

• Reconstitution du tampon RAV1+Carrier : à réaliser selon les recommandations du fournisseur.

• Reconstitution du tampon RAV3 : ajouter le volume requis d’éthanol à 96–100 % selon les recommandations du fournisseur.

Réalisation de la procédure de puriﬁcation

a. Mélanger les composants suivants dans l’ordre indiqué, puis passer immédiatement à l’étape

suivante.

Composant Volume par échantillon testé Volume par échantillon témoin

puriﬁé

Échantillon préparé

• 100 µl de sang total ou de

sérum

•100 µl de surnageant de tissu

—

Eau sans nucléase — 100 µl

RAV1+Carrier Buer 560 µl 560 µl

b. Vortexer pendant 15 secondes.

c. Incuber à température ambiante pendant 10 minutes.

Remarque : En cas de sang coagulé, incuber 10 minutes à 70°C.

d. Ajouter 560 µl d’éthanol à 96–100 % sur chaque échantillon, vortexer pendant 15 secondes, puis

centrifuger rapidement pour prélever le contenu.

1Lyse et homogénéisation

des échantillons

14 Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

a. Insérer une colonne de kit NucleoSpin™ RNA Virus dans un tube collecteur, puis transférer 630 μl

de l’échantillon sur la colonne.

b. Boucher la colonne, puis centrifuger l’ensemble à 10 000 × g pendant 1 minute.

c. Jeter le tube collecteur, puis positionner la colonne sur un nouveau tube collecteur.

d. Transférer le volume restant de l’échantillon sur la colonne, boucher la colonne, puis centrifuger

à 10 000 × g pendant 1 minute.

e. Jeter le tube collecteur, puis positionner la colonne sur un nouveau tube collecteur.

2Liaison de l’ARN à la

colonne

a. Ajouter 500 μl de tampon RAW sur chaque colonne, boucher les colonnes, puis centrifuger à

10 000 × g pendant 1 minute.

b. Jeter le tube collecteur, puis positionner la colonne sur un nouveau tube collecteur.

c. Ajouter 630 μl de tampon RAV3 sur chaque colonne, boucher les colonnes, puis centrifuger à

10 000 × g pendant 1 minute.

d. Jeter le tube collecteur, puis positionner la colonne sur un nouveau tube collecteur.

e. Centrifuger à 10 000 × g pendant 3 minutes pour sécher la membrane.

f. Jeter le tube collecteur.

g. Positionner la colonne sur un nouveau microtube de 1,5 ml et ajouter 50 µl d’eau sans nucléase.

h. Boucher la colonne puis incuber à température ambiante pendant 1 minute.

i. Centrifuger à 10 000 × g pendant 1 minute, puis jeter la colonne.

L’ARN puriﬁé se trouve dans le microtube.

Conserver l’ARN puriﬁé entre 2°C et 8°C pour une utilisation immédiate ou en dessous de -16°C pour

une conservation à long terme.

3Lavage, puis élution de

l’ARN

Puriﬁcation de l’ARN avec le kit NucleoSpin™ 8 Virus/NucleoSpin™ 96 Virus (méthode manuelle)

Avant la première utilisation du kit

• Reconstitution du tampon RAV1+Carrier : à réaliser selon les recommandations du fournisseur.

• Reconstitution du tampon RAV3 : ajouter le volume requis d’éthanol à 96–100 % selon les recommandations du fournisseur.

• Reconstitution de la PK : ajouter le volume requis de tampon PB Buer selon les recommandations du fournisseur.

Réalisation de la procédure de puriﬁcation

a. Mélanger les composants suivants dans une plaque de lyse (MN Round‑Well Block) ou une

barrette de lyse (rack de barrettes de tubes), puis passer immédiatement à l’étape suivante.

Composant Volume par échantillon testé Volume par échantillon témoin

puriﬁé

Échantillon préparé

• 100 µl de sang total ou de

sérum

•100 µl de surnageant de tissu

—

Eau sans nucléase — 100 µl

RAV1+Carrier Buer 400 µl 400 µl

Protéinase K 20 μl 20 μl

1Lyse et homogénéisation

des échantillons

Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit 15

1Lyse et

homogénéisation des

échantillons (suite)

b. Homogénéiser par aspiration-refoulement 4-5 fois pour mélanger, puis sceller la plaque avec un

ﬁlm adhésif.

c. Incuber à 70℃ pendant 10 minutes.

d. Laisser refroidir les broyats, puis centrifuger brièvement les broyats pour faire diminuer la

condensation.

e. Ajouter 400 µl d’éthanol à 96-100% à chaque broyat, puis homogénéiser 10 à 15 fois par

aspiration-refoulement.

a. Placer une NucleoSpin™ Virus Binding Plate (plaque d’extraction) ou une NucleoSpin™ Virus

Binding Strip (barrette d’extraction) sur un nouveau MN Square‑Well Block, puis transférer

chaque broyat vers les puits appropriés de la plaque/barrette d’extraction.

b. Sceller la plaque/barrette d’extraction avec un ﬁlm adhésif, puis centrifuger l’ensemble à

5 600 x g pendant 2 minutes.

c. Jeter le MN Square‑Well Block, puis placer la plaque/barrette d’extraction sur un nouveau MN

Square‑Well Block.

2Liaison de l’ARN à la

colonne

Préchauer un aliquot d’eau exempte de nucléase à 70°C.

a. Ajouter 500 µl de tampon RAW dans chaque puits, fermer à l’aide d’un ﬁlm adhésif, puis

centrifuger 2 minutes à 5 600 × g.

b. Jeter le MN Square‑Well Block, puis placer la plaque/barrette d’extraction sur un nouveau MN

Square‑Well Block.

c. Ajouter 700 µl de tampon RAV3 dans chaque puits, fermer à l’aide d’un ﬁlm adhésif, puis

centrifuger 2 minutes à 5 600 × g.

d. Jeter le MN Square‑Well Block, puis placer la plaque/barrette d’extraction sur un nouveau MN

Square‑Well Block.

e. Ajouter 700 µl de tampon RAV3 dans chaque puits, fermer à l’aide d’un ﬁlm adhésif, puis

centrifuger 15 minutes à 5 600 × g.

f. Jeter le MN Square‑Well Block.

g. Placer la plaque/barrette d’extraction sur une plaque ou barrette d’élution, puis ajouter 80 μl

d’eau exempte de nucléase (préchauée à 70°C) à chaque puits.

h. Sceller la plaque/barrette d’extraction avec du ﬁlm adhésif, puis incuber à température ambiante

pendant 1–2 minutes.

i. Centrifuger à 5 600 × g pendant 2 minutes, puis jeter la plaque/barrette d’extraction.

L’ARN puriﬁé se trouve dans la plaque/barrette d’élution.

Conserver l’ARN puriﬁé entre 2°C et 8°C pour une utilisation immédiate ou en dessous de -16°C pour

une conservation à long terme.

3Lavage, puis élution de

l’ARN

Bonnes pratiques de laboratoire pour la PCR et la RT-PCR

•Porter des gants et une blouse de laboratoire propres.

– Ne pas porter les mêmes gants et la même blouse que ceux précédemment portés pour manipuler des produits ampliﬁés ou

préparer des échantillons.

• Changer systématiquement de gants en cas de doute quant à leur contamination possible.

• Maintenir des zones distinctes ainsi que des équipements et des fournitures dédiés pour les étapes suivantes :

– Préparation des échantillons et conﬁguration de la réaction.

–Ampliﬁcation et analyse des produits.

16 Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

• Ne pas introduire les produits ampliﬁés dans la zone pré-PCR de la réaction.

• Ouvrir et fermer tous les tubes d’échantillon avec soin. Éviter toute projection ou création d’aérosols.

• Maintenir les composants et les réactifs fermés dans la mesure du possible.

• Utiliser une pipette à piston ou des embouts de pipette résistant aux aérosols.

• Nettoyer régulièrement les paillasses et équipements de laboratoire avec une solution d’eau de Javel à 10 % ou une solution de

décontamination ADN.

Annexe A Puriﬁcation avec l’instrument KingFisher™ Duo Prime ou KingFisher™ mL

Suivre cette procédure pour la puriﬁcation avec le MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit à l’aide de l’instrument KingFisher™ Duo

Prime ou KingFisher™ mL.

Matériels requis non fournis

Tableau 9 Matériels requis pour le traitement avec les instruments KingFisher™ Duo Prime et KingFisher™ mL

Article Source[1]

Consommables pour l’instrument KingFisher™ Duo Prime

KingFisher™ Duo Pack Combi pour plaque Microtiter 96 Deepwell (peignes, plaques et barrettes

d’élution pour 96 échantillons) 97003530

KingFisher™ Duo Elution Strip (pack de 40)[2] 97003520

KingFisher™ Duo Peigne à 12 pointes pour plaque Microtiter 96 Deepwell (pack de 50)[2] 97003500

KingFisher™ Flex Microtiter Deep-Well 96 plates[2] 95040460

Consommables pour l’instrument KingFisher™ mL

KingFisher™ mL Tubes et peignes (pour 240 échantillons) 97002141

KingFisher™ mL Peigne (800 unités) 97002111

KingFisher™ mL Tube (20 x 45 unités) 97002121

[1] Sauf indication contraire, tous les produits sont disponibles sur thermofisher.com. « PFL » indique que le matériel est disponible sur fisherscientific.com ou auprès d'un autre grand

fournisseur de laboratoire.

[2] Inclus dans le pack KingFisher™ Duo Combi (Réf. 97003530).

Procédure de puriﬁcation

Remarque : Quand le protocole de traitement est réalisé à l’aide d’un instrument KingFisher™ mL, mélanger les échantillons par

aspiration-refoulement. Ne pas utiliser d’agitateur de plaques avec les barrettes de tubes requises par l’instrument.

1. Suivre le protocole, de la préparation du lysat d’échantillon au mélange des échantillons avec les billes et la solution de lyse.

Remarque : Ne pas préparer les plaques ou les tubes pour le traitement avant d’avoir préparé les échantillons.

Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit 17

2. Ajouter les MagMAX™ CORE Wash Solutions et MagMAX™ CORE Elution Buer aux emplacements indiqués, selon votre instrument.

Tableau 10 Conﬁguration de la plaque : Instrument KingFisher™ Duo Prime

ID de la ligne Ligne sur la plaque Type de plaque Réactif Volume par puits

Échantillon A Deep Well Mélange billes/lysat d’échantillon Varie selon l’échantillon

Lavage 1 B MagMAX™ CORE Wash Solution 1 500 µl

Lavage 2 C MagMAX™ CORE Wash Solution 2 500 µl

Élution[1] Barrette de tubes

séparée[2] Barrette d’élution MagMAX™ CORE Elution Buer 90 µl

Peigne H Deep Well Placer un peigne protecteur dans la plaque.

[1] S’assurer que la barrette d’élution est placée dans le bon sens dans le bloc d’élution.

[2] Placée sur l’élément chauffant.

Tableau 11 Conﬁguration de la barrette de tubes : Instrument KingFisher™ mL

ID de la position Position de la

barrette de tubes Tube Réactif Volume par puits

Échantillon 1 Standard Mélange billes/lysat d’échantillon Varie selon l’échantillon

Lavage 1 2 MagMAX™ CORE Wash Solution 1 500 µl

Lavage 2 3 MagMAX™ CORE Wash Solution 2 500 µl

Élution 4 MagMAX™ CORE Elution Buer 90 µl

Peigne S/O S/O Glisser le peigne dans le support pour peigne.

3. Sélectionner le script approprié sur l’instrument (voir “Téléchargement et installation du script” en page 7).

Remarque : Pour un traitement rapide des échantillons, sélectionner l’un des scripts express suivants sur l’instrument.

·KingFisher™ Duo Prime : MagMAX_CORE_DUO_Express.bdz

·KingFisher™ mL : MagMAX_CORE_mL_Express.bdz

4. Démarrer le test, puis charger les plaques préparées ou les barrettes de tubes dans l’instrument en même temps. L’instrument ne

vous invite pas à charger les éléments individuellement.

• Conserver l’acide nucléique puriﬁé sur glace pour une utilisation immédiate, à -20°C pendant 1 mois maximum, ou à -80°C pour une

conservation à long terme.

• Pour les échantillons traités avec un script express, réaliser une RT-PCR temps réel avec le proﬁl thermique express (voir VetMAX™

Schmallenberg Virus Kit Notice d’utilisation [Pub. N° MAN0007811]).

Annexe B Documentation et support

Assistance à la clientèle et support technique

Visiter thermoﬁsher.com/support pour obtenir les informations les plus récentes sur les services et le support.

• Numéros de téléphone de contact internationaux

• Informations sur le support produit

– FAQ relatives aux produits

– Logiciels, correctifs et mises à jour

– Formations sur de nombreux instruments et applications

• Commandes et assistance en ligne

• Documentation produit

– Guides de l’utilisateur, manuels et protocoles

–Certiﬁcats d’analyse

– Fiches de données de sécurité (FDS)

Remarque : Pour obtenir les FDS relatives aux réactifs et produits chimiques d’autres fabricants, contacter ces derniers.

18 Guide complémentaire de VetMAX™ Schmallenberg Virus Kit

Garantie limitée du produit

Life Technologies Corporation et ses ﬁliales garantissent leurs produits selon les termes et conditions générales de ventes disponibles

sur le site www.thermoﬁsher.com/us/en/home/global/terms-and-conditions.html. Si vous avez des questions, vous pouvez prendre

contact avec Life Technologies à l’adresse web suivante : www.thermoﬁsher.com/support.

Personne morale : Life Technologies Corporation | Carlsbad, CA 92008 États-Unis | Numéro gratuit aux États-Unis 1 800 955 6288

Les informations contenues dans ce guide sont susceptibles d’être modiﬁées sans préavis.

CLAUSE DE NON-RESPONSABILITÉ: DANS LA MESURE PERMISE PAR LA LOI, THERMO FISHER SCIENTIFIC INC. ET/OU SA OU SES FILIALE(S) NE SAURAIENT ÊTRE TENUES

RESPONSABLES DE DOMMAGES SPÉCIAUX, ACCESSOIRES, INDIRECTS, PUNITIFS, MULTIPLES OU CONSÉCUTIFS LIÉS AU PRÉSENT DOCUMENT OU A SON USAGE OU EN

RÉSULTANT.

Traduit de l’anglais, publication numéro MAN0019464 Rév. A.0.

Historique des révisions: Pub. Nº MAN0019464

Révision Date Description

A.0 28 septembre 2020 Nouveau document traduit à partir d’un document en français (MAN0008246 Rév. C.0) avec les mises à jour suivantes :

• Ajout du protocole MagMAX™ CORE Nucleic Acid Puriﬁcation Kit.

•Modiﬁcations mineures de la formulation et de la mise en page pour plus de cohérence avec les documents connexes.

Informations importantes sur les licences : Ces produits peuvent être couverts par une ou plusieurs licences à usage limité. En utilisant ces produits, vous acceptez les conditions

générales de toutes les licences à usage limité.

une marque de MP Biomedicals, LLC. Mixer/Mill est une marque de SPEX SamplePrep, LLC. Precellys est une marque de Bertin Technologies. QIAamp et QIAGEN sont des marques

de QIAGEN GmbH. Nucleospin est une marque de MACHEREY‑NAGEL.

thermoﬁsher.com/support | thermoﬁsher.com/askaquestion

thermoﬁsher.com

16 Décembre 2020