Thermo Fisher Scientific Applied Biosystems StepOne™ Système Le manuel du propriétaire

Applied Biosystems StepOne™

Système de PCR en temps réel

Expériences de quantification absolue par la

méthode des courbes standard

Guide de mise en route

Applied Biosystems StepOne™

Système de PCR en temps réel

Expériences de quantification absolue par la

méthode des courbes standard

Prise en main

Conception de

l’expérience

Préparation des

réactions

Réalisation de

l’expérience

Analyse de

l’expérience

Guide de mise en route

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NOTICE TO PURCHASER: Label License

The StepOne™ Real-Time PCR System is covered by US patents and corresponding claims in their non-US counterparts, owned by Applied Biosystems. No

right is conveyed expressly, by implication, or by estoppel under any other patent claim, such as claims to apparatus, reagents, kits, or methods such as 5′

nuclease methods. Further information on purchasing licenses may be obtained by contacting the Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln

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TRADEMARKS:

Applera, Applied Biosystems, AB (Design), MicroAmp, Primer Express, and VIC are registered trademarks, and FAM, JOE, ROX, StepOne, and TAMRA

are trademarks of Applied Biosystems ou de ses filiales aux États-Unis et/ou dans d’autres pays.

AmpErase, AmpliTaq Gold, and TaqMan are registered trademarks of Roche Molecular Systems, Inc.

SYBR is a registered trademark of Molecular Probes, Inc.

Macintosh is a registered trademark of Apple Computer, Inc.

Microsoft and Windows are registered trademarks of Microsoft Corporation.

All other trademarks are the sole property of their respective owners.

Référence 4377738 Rév. B

06/2010

Table des matières

iii

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

Préface . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . vii

Utilisation de ce guide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . vii

Informations supplémentaires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . viii

Comment obtenir une assistance . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . x

Conventions de sécurité utilisées dans ce document . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xi

Symboles sur les instruments . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xiii

Étiquettes de sécurité sur les instruments . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xv

Sécurité générale de l’instrument . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xvi

Sécurité chimique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xvii

Sécurité des déchets chimiques . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xix

Sécurité électrique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xx

Sécurité des diodes électroluminescentes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxi

Sécurité des dangers biologiques . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxi

Sécurité de la station de travail . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . xxii

Normes de sécurité et de compatibilité électromagnétique (CEM) . . . . . . . . . . . . . xxiii

Chapitre 1 Prise en main . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1

À propos du système StepOne™ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2

À propos des expériences de quantification absolue par les courbes standard . . . . . . 4

Utilisation de ce guide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7

À propos de l’exemple . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8

Workflow de l’exemple . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

Chapitre 2 Conception de l’expérience . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11

Présentation du chapitre . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12

Préparation d’une expérience . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13

Définition des paramètres de l’écran Experiment Properties

(Propriétés de l’expérience) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16

Définition des méthodes et des matériels nécessaires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

Configuration des cibles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

Configuration des standards . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

Configuration des échantillons . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25

Configuration du profil de thermocyclage . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27

Vérification de la préparation des réactions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28

Commande des matériels nécessaires pour l’expérience . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34

Finalisation du workflow de l’assistant de programmation Design Wizard . . . . . . . . . 37

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

iv

Chapitre 3 Préparation des réactions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41

Présentation du chapitre . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42

Préparation des dilutions d’échantillons . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43

Préparation des gammes de dilutions standard . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45

Préparation du mélange réactionnel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48

Préparation de la plaque de réactions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50

Chapitre 4 Réalisation de l’expérience . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55

Présentation du chapitre . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56

Préparation de la réaction de PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57

(Facultatif) Activation des notifications . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59

Démarrage de la réaction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61

Surveillance de la réaction de PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 65

Retrait de la plaque de réactions et transfert des données . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 74

Chapitre 5 Analyse de l’expérience . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 77

Présentation du chapitre . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 78

Section 5.1: Vérification des résultats . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 79

Analyse de l’expérience . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 80

Affichage de la courbe standard . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 86

Affichage de la courbe d’amplification . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 88

Affichage du tableau des résultats . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93

Exportation des données . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 96

Section 5.2: Identification des causes d’erreurs (si nécessaire) . . . . . . . . . . . . . . . 97

Affichage des paramètres d’analyse . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98

Affichage de la synthèse de contrôle qualité (CQ) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100

Exclusion de puits dans une analyse . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 102

Affichage de la courbe des multicomposantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 104

Affichage de la courbe des données brutes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107

Annexe A Autres workflows d’expérience . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 109

Workflow Advanced Setup (Configuration avancée) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 110

Workflow QuickStart (Démarrage rapide) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 111

Workflow Template (Modèle) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 112

Workflow Export/Import (Exportation/Importation) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 113

Bibliographie. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 115

v

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

Glossaire . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 117

Index . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 131

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

vi

vii

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

Préface

Utilisation de ce guide

Objectif de ce

guide

Ce guide explique comment réaliser une expérience de quantification absolue par les

courbes standard sur le système de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

(système StepOne™). Il possède deux utilisations :

• Tutoriel, grâce aux données de l’exemple fourni avec le logiciel du système de PCR

en temps réel Applied Biosystems StepOne™ (logiciel StepOne™).

• Aide-mémoire, pour réaliser des expériences sur la base de connaissances pratiques.

Public concerné Ce guide est destiné aux personnels de laboratoire et aux directeurs de recherche qui

effectuent des expériences de PCR en temps réel sur le système StepOne.

Prérequis Le contenu de ce guide s’appuie sur les prérequis suivants :

• L’utilisateur est familier du système d’exploitation Microsoft Windows® XP.

• L’utilisateur est familier d’Internet et des navigateurs Web.

• L’utilisateur sait comment manipuler les échantillons d’ADN/ARN et les préparer

pour la PCR.

• L’utilisateur comprend les procédures de stockage de données, de transfert de

fichiers et de copier-coller.

• L’utilisateur possède une expérience de la mise en réseau s’il souhaite intégrer

le système StepOne au réseau de données de son laboratoire.

Conventions

typographiques

Ce guide utilise les conventions suivantes :

• Le texte en gras indique une action de l’utilisateur. Par exemple :

Taper 0, puis appuyer sur Entrée pour chaque champ restant.

• Le texte en italique est utilisé pour signaler des termes nouveaux ou importants

et pour mettre un élément en valeur. Par exemple :

Avant l’analyse, toujours préparer une matrice fraîche.

• Une flèche vers la droite () sépare des commandes successives à sélectionner

dans un menu déroulant ou un ensemble de raccourcis. Par exemple :

Sélectionner File (Fichier)Open (Ouvrir).

Préface

Informations supplémentaires

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

viii

Mises en garde

à l’attention des

utilisateurs

Deux types de mises en garde apparaissent dans la documentation destinée aux

utilisateurs des produits Applied Biosystems. Chaque mention implique un degré

de mise en garde particulier ou l’une des actions décrites ci-dessous :

Remarque : – Fournit des informations potentiellement utiles mais non critiques

pour l’utilisation du produit.

IMPORTANT ! – Fournit des informations nécessaires au bon fonctionnement de

l’instrument, à un usage précis du kit de réactifs ou à la manipulation d’un produit

chimique en toute sécurité.

Exemples de mises en garde à l’attention des utilisateurs :

Remarque : La fonction Calibrate (Calibrer) est également disponible dans la console

de commande.

IMPORTANT ! Pour vérifier la connexion client, il est impératif de posséder un

ID utilisateur valide.

Alertes à la

sécurité

La documentation destinée aux utilisateurs comporte également des alertes à la sécurité.

Pour plus d’informations, voir « Alertes à la sécurité » à la page xi.

Informations supplémentaires

Documentation

relative

Le système StepOne est fourni avec les documents suivants :

Document Réf. Réf.

(Français)

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Getting

Started Guide for Genotyping Experiments

4376786 4376727

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Getting

Started Guide for Presence/Absence Experiments 4376787 4376726

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Getting

Started Guide for Relative Standard Curve and Comparative CT

Experiments

4376785 4376744

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Getting

Started Guide for Standard Curve Experiments

4376784 4376738

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System

Installation, Maintenance, and Networking Guide

4376782 4377800

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System

Installation Quick Reference Card

4376783 4376794

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Site

Preparation Guide

4376768 4378361

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Software

Help

——

Préface

Informations supplémentaires

ix

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

Les documents suivants sont disponibles auprès de Applied Biosystems :

Remarque : Pour plus de renseignements sur la documentation, voir « Comment obtenir

une assistance » à la page x.

Obtention

d’informations

dans l’aide du

logiciel

L’aide du logiciel StepOne décrit l’utilisation de chaque fonction disponible dans

l’interface utilisateur. Pour accéder à l’aide depuis le logiciel StepOne, procéder

comme suit :

• Appuyer sur F1.

• Cliquer sur dans la barre d’outils.

• Sélectionner Help (Aide)StepOne Help (Aide de StepOne) dans le menu.

Pour localiser un thème dans l’aide :

• Consulter la table des matières.

• Rechercher un thème spécifique.

• Rechercher dans un index alphabétique.

Envoi de

commentaires

Dans le but d’améliorer sa documentation, Applied Biosystems invite les utilisateurs

à lui faire part de leurs commentaires et suggestions. Merci de les envoyer par courrier

électronique à l’adresse :

[email protected]

IMPORTANT ! Cette adresse électronique est uniquement destinée à l’envoi de

commentaires et de suggestions sur la documentation. Pour commander des documents,

télécharger les fichiers PDF ou obtenir de l’aide sur une question technique, visiter le site

http://www.appliedbiosystems.com et cliquer sur le lien Support (Assistance). (Voir

« Comment obtenir une assistance » ci-dessous.)

Document Réf.

Amplification Efficiency of TaqMan® Gene Expression Assays

Application Note

127AP05

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Installation

Performance Verification Protocol

4376791

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Installation

Qualification-Operation Qualification Protocol

4376790

Applied Biosystems StepOne™ Real-Time PCR System Planned

Maintenance Protocol

4376788

Custom TaqMan® Gene Expression Assays Protocol 4334429

Primer Express® Software Version 3.0 Getting Started Guide 4362460

TaqMan® Gene Expression Assays Protocol 4333458

User Bulletin #2: Relative Quantitation of Gene Expression 4303859

Préface

Comment obtenir une assistance

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

x

Comment obtenir une assistance

Pour obtenir les dernières informations sur les services et le support technique dans tous

les pays, visiter le site http://www.appliedbiosystems.com et cliquer sur le lien

Support (Assistance).

La page Support (Assistance) permet d’effectuer les actions suivantes :

• Rechercher un sujet dans le forum aux questions (FAQ)

• Poser une question directement au support technique

• Commander des documents utilisateur Applied Biosystems, des fiches de données

de sécurité, des certificats d’analyse et d’autres documents relatifs

• Télécharger des documents au format PDF

• Obtenir des informations sur les formations proposées à nos clients

• Télécharger des mises à jour et correctifs de logiciels

La page Support (Assistance) présente également les numéros de téléphone et de

télécopie qui permettent de contacter le support technique et les sites commerciaux

Applied Biosystems partout dans le monde.

IMPORTANT ! Sur instruction de ce guide, ou pour programmer la maintenance de

l’instrument StepOne™ (par exemple les opérations de maintenance planifiée annuelle

ou de contrôle/calibration de la température), contacter le Centre de service clientèle

Applied Biosystems. Pour obtenir un numéro de téléphone ou envoyer un e-mail au

Centre, visiter le site http://www.appliedbiosystems.com/support/contact.

Préface

Conventions de sécurité utilisées dans ce document

xi

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

Conventions de sécurité utilisées dans ce document

Alertes à la

sécurité

Quatre alertes à la sécurité apparaissent dans la documentation destinée aux utilisateurs

des produits Applied Biosystems. Elles sont insérées à des endroits spécifiques pour

attirer l’attention du lecteur sur des risques importants. Chaque alerte – IMPORTANT,

ATTENTION, AVERTISSEMENT, DANGER – implique un degré de mise en garde

ou une action spécifique.

Définition

IMPORTANT ! – Fournit des informations nécessaires au bon fonctionnement de

l’instrument, à un usage précis du kit de réactifs ou à la manipulation d’un produit

chimique en toute sécurité.

– Indique une situation potentiellement dangereuse susceptible

d’entraîner des blessures légères ou mineures si elle n’est pas évitée. Ce message peut

aussi servir de mise en garde contre les pratiques dangereuses.

– Indique une situation potentiellement dangereuse susceptible

d’entraîner des blessures graves voire la mort si elle n’est pas évitée.

– Indique une situation dangereuse imminente qui entraînera des

blessures graves voire la mort si elle n’est pas évitée. Cette mise en garde est limitée

aux situations les plus extrêmes.

À l’exception d’IMPORTANT, chaque alerte à la sécurité présente dans un document

Applied Biosystems est accompagnée d’un panneau triangulaire contenant un symbole

de danger. Ces symboles sont identiques à ceux figurant sur les instruments

Applied Biosystems (voir « Symboles de sécurité » à la page xiii).

Préface

Conventions de sécurité utilisées dans ce document

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

xii

Exemples

IMPORTANT ! Il convient de créer un tableur distinct pour la saisie des échantillons de

chaque plaque de 96 puits.

DANGER CHIMIQUE. Le réactif TaqMan® Universal PCR

Master Mix peut provoquer une irritation des yeux et de la peau. Toute exposition peut

entraîner un malaise en cas d’ingestion ou d’inhalation. Lire la fiche de données de

sécurité applicable et suivre les consignes de manipulation. Porter des protections

oculaires, des gants et des vêtements appropriés.

DANGER DE BLESSURE CORPORELLE. Lorsque

l’instrument est en fonctionnement, la température du couvercle chauffant et du bloc

peut dépasser 100 °C (212 °F).

DANGER ÉLECTRIQUE. L’usage permanent d’un dispositif de

mise à la terre est crucial pour la sécurité. Ne jamais utiliser le système lorsque le

dispositif de mise à la terre est déconnecté.

Préface

Symboles sur les instruments

xiii

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

Symboles sur les instruments

Symboles

électriques sur les

instruments

Le tableau suivant décrit les symboles électriques susceptibles d’apparaître sur les

instruments Applied Biosystems.

Symboles de

sécurité

Le tableau suivant décrit les symboles de sécurité susceptibles d’apparaître sur les

instruments Applied Biosystems. Ces symboles de sécurité peuvent être apposés seuls

ou accompagnés d’un texte expliquant le risque correspondant (voir « Étiquettes de

sécurité sur les instruments » à la page xv). Ils peuvent également apparaître à côté des

mises en garde DANGER, AVERTISSEMENT et ATTENTION inclus dans le texte des

documents associés aux produits, ce guide compris.

Symbole Description Symbole Description

Position Marche de

l’interrupteur d’alimentation

principale.

Borne pouvant être connectée

à la mise à la terre d’un autre

instrument. Ce n’est pas une

borne de mise à la terre

protégée.

Position Arrêt de

l’interrupteur d’alimentation

principale. Borne de mise à la terre de

protection devant être reliée

à la terre avant d’effectuer tout

autre raccordement électrique

à l’instrument.

Commutateur permettant de

mettre l’instrument en Veille.

Lorsqu’il est en position

Veille, l’instrument présente

un risque d’électrocution. Borne pouvant recevoir ou

envoyer une tension ou un

courant alternatif.

Position Marche/Arrêt de

l’interrupteur d’alimentation

principale à bouton poussoir.

Borne pouvant recevoir ou

envoyer une tension ou un

courant direct ou alternatif.

Symbole Description Symbole Description

Avertit l’utilisateur de la

nécessité de consulter le

manuel pour obtenir davantage

d’informations et de procéder

avec les précautions qui

s’imposent.

Indique la présence de pièces

en mouvement et la nécessité

de procéder avec les

précautions qui s’imposent.

Indique un risque

d’électrocution et la nécessité

de procéder avec les

précautions qui s’imposent.

Indique la présence d’une

surface chaude ou un risque

de température élevée, ainsi

que la nécessité de procéder

avec les précautions qui

s’imposent.

Indique la présence d’un laser

à l’intérieur de l’instrument et la

nécessité de procéder avec les

précautions qui s’imposent.

Préface

Symboles sur les instruments

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

xiv

Symboles

environnementaux

sur les

instruments

Le symbole suivant s’applique à tous les produits électriques et électroniques

commercialisés par Applied Biosystems sur le marché européen après le 13 août 2005.

Symbole Description

Ne pas éliminer ce produit avec les déchets usuels non soumis au tri

sélectif. Se conformer à la réglementation locale relative à l’élimination des

déchets usuels pour réduire l’impact environnemental des résidus provenant

des équipements électriques et électroniques.

Utilisateurs de l’Union européenne :

Appeler le bureau local du Service clientèle Applied Biosystems pour connaître

les procédures d’enlèvement et de recyclage des équipements. Consulter le

site http://www.appliedbiosystems.com pour obtenir la liste des bureaux

du Service clientèle dans l’Union européenne.

Préface

Étiquettes de sécurité sur les instruments

xv

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

Étiquettes de sécurité sur les instruments

Les mentions ATTENTION, AVERTISSEMENT et DANGER peuvent apparaître sur les

instruments Applied Biosystems accompagnées des symboles de sécurité décrits dans

la section précédente.

Emplacement des

avertissements

Le système StepOne contient un avertissement à l’emplacement indiqué ci-dessous :

English Français

CAUTION Hazardous chemicals. Read the

Material Safety Data Sheets (MSDSs) before

handling.

ATTENTION Produits chimiques dangereux.

Lire les fiches de données de sécurité des

matériels avant la manipulation des produits.

CAUTION Hazardous waste. Refer to

MSDS(s) and local regulations for handling

and disposal.

ATTENTION Déchets dangereux. Lire les

fiches de données de sécurité des matériels

et les réglementations locales en matière de

manipulation et d’élimination des déchets.

CAUTION Hot surface. ATTENTION Surface brûlante.

DANGER High voltage. DANGER Haute tension.

WARNING To reduce the chance of electrical

shock, do not remove covers that require tool

access. No user-serviceable parts are inside.

Refer servicing to Applied Biosystems

qualified service personnel.

AVERTISSEMENT Pour éviter les risques

d'électrocution, ne pas retirer les capots dont

l'ouverture nécessite l'utilisation d'outils.

L’instrument ne contient aucune pièce

réparable par l’utilisateur. Toute intervention

doit être effectuée par le personnel de service

qualifié d’Applied Biosystems.

CAUTION Moving parts. ATTENTION Parties mobiles.

DANGER Class 3B (III) visible and/or invisible

LED radiation present when open and

interlocks defeated. Avoid exposure to beam.

DANGER Rayonnement visible ou invisible

d’un faisceau DEL de Classe 3B (III) en cas

d’ouverture et de neutralisation des

dispositifs de sécurité. Eviter toute exposition

au faisceau.

Préface

Sécurité générale de l’instrument

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

xvi

Sécurité générale de l’instrument

DANGER DE BLESSURE CORPORELLE. Toute utilisation non

conforme avec les indications fournies par Applied Biosystems peut provoquer des

blessures corporelles ou endommager l’instrument.

Déplacement

et levée de

l’instrument

DANGER DE BLESSURE CORPORELLE. L’instrument doit être

déplacé et positionné uniquement par le personnel ou le fournisseur indiqué dans le

guide de préparation du site. Ne pas tenter de soulever ou de déplacer l’instrument après

l’installation sans l’aide d’une tierce personne. Toujours utiliser le matériel de transport

et les techniques de levée appropriés. En soulevant incorrectement l’appareil, l’opérateur

risque de se blesser au dos de façon permanente. En fonction du poids de l’instrument,

le déplacement et/ou la levée peuvent nécessiter la présence d’au moins deux personnes.

Déplacement

et levée

d’ordinateurs et

de moniteurs

autonomes

Ne pas tenter de lever ou de déplacer l’ordinateur ou le moniteur

sans l’aide d’une tierce personne. En fonction du poids de l’ordinateur et/ou du moniteur,

le déplacement peut nécessiter la présence d’au moins deux personnes.

Éléments à prendre en compte avant la levée de l’ordinateur et/ou du moniteur :

• Avant la levée de l’ordinateur ou du moniteur, s’assurer d’une prise en main ferme,

confortable et sûre.

• Vérifier que le parcours emprunté pour déplacer l’objet est dégagé de tout obstacle.

• Ne pas soulever un objet et effectuer en même temps une rotation du torse.

• Garder le dos bien droit et soulever en poussant uniquement avec les jambes.

• Les différents intervenants doivent coordonner leurs mouvements de levée et de

déplacement avant chaque manœuvre.

• Au lieu de soulever l’objet alors qu’il se trouve dans le carton, basculer

délicatement ce dernier sur le côté, puis le maintenir en position pendant

qu’une autre personne en fait glisser le contenu.

Utilisation de

l’instrument

Chaque utilisateur de l’instrument doit :

• Être informé des pratiques de sécurité générales des laboratoires et spécifiques

de l’instrument.

• Lire et comprendre toutes les fiches de données de sécurité concernées.

Voir « À propos des fiches de données de sécurité » à la page xviii.

Nettoyage ou

décontamination

de l’instrument

Avant d’utiliser une méthode de nettoyage ou de décontamination

autre que celles recommandées par le fabricant, vérifier auprès de celui-ci qu’elle ne

risque pas d’endommager l’appareil.

Préface

Sécurité chimique

xvii

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

Sécurité chimique

Mise en garde sur

les dangers

chimiques

DANGER CHIMIQUE. Avant de manipuler des produits

chimiques, se référer à la fiche de données de sécurité fournie par le fabricant

et respecter toutes les précautions d’usage.

DANGER DE STOCKAGE CHIMIQUE. En raison des risques de

bris ou d’éclatement du verre, ne jamais recueillir ou entreposer les déchets dans un

récipient en verre. Les bouteilles de déchets ou de réactifs composées de verre peuvent

se fendre et fuir. Chaque bouteille de déchets doit être sécurisée dans un conteneur de

protection en polyéthylène à faible densité dont le couvercle doit être fixé et les poignées

verrouillées en position verticale. Porter des gants, des vêtements et des protections

oculaires appropriés en manipulant les bouteilles de déchets et de réactifs.

Instructions de

sécurité chimique

Pour limiter les dangers chimiques :

• Lire et comprendre les fiches de données sur la sécurité des produits chimiques

fournies par le fabricant avant de stocker, manipuler ou utiliser les matériaux

dangereux ou les produits chimiques. (Voir « À propos des fiches de données de

sécurité » à la page xviii.)

• Limiter les contacts avec les produits chimiques. Porter des équipements de

protection appropriés lors de la manipulation des produits chimiques (par exemple :

lunettes de sûreté, gants ou vêtements de protection). Pour obtenir d’autres

consignes de sécurité, consulter les fiches de données de sécurité.

• Limiter l’inhalation des produits chimiques. Ne pas laisser les récipients des

produits chimiques ouverts. Ils ne doivent être utilisés qu’avec une ventilation

adéquate (par exemple sous une hotte fermée). Pour obtenir d’autres consignes

de sécurité, consulter les fiches de données de sécurité.

• Vérifier régulièrement l’absence de fuite ou d’écoulement des produits chimiques.

En cas de fuite ou d’écoulement d’un produit, respecter les directives de nettoyage

du fabricant recommandées sur la fiche de données de sécurité.

• Respecter toutes les réglementations locales, nationales et communautaires quant

au stockage, à la manipulation et à l’élimination des produits chimiques.

Préface

Sécurité chimique

Guide de mise en route pour les expériences de quantification absolue par les courbes standard sur le système

de PCR en temps réel Applied Biosystems StepOne™

xviii

À propos des

fiches de données

de sécurité

Les fabricants fournissent à leurs nouveaux clients des fiches de données de sécurité

avec les produits chimiques dangereux. Ils transmettent également des fiches de données

de sécurité avec la première livraison d’un produit chimique dangereux dès que ces

documents sont mis à jour. Les fiches de données de sécurité incluent les consignes de

sécurité destinées au stockage, à la manipulation, au transport et à la mise au rebut des

produits chimiques dans des conditions sécurisées.

À chaque nouvelle fiche de données de sécurité fournie avec un produit chimique

dangereux, nous recommandons fortement de mettre à jour les archives.

Obtention de

fiches de données

de sécurité

La fiche de données de sécurité des produits chimiques fournis par Applied Biosystems

est disponible gratuitement 24 h/24. Pour obtenir des fiches de données de sécurité :

1. Aller à la page https://docs.appliedbiosystems.com/msdssearch.html.

2. Dans le champ Search (Rechercher) de la page MSDS Search (Rechercher une fiche

de données de sécurité) :

a. Taper le nom du produit chimique, le numéro de référence ou toute autre

information susceptible de distinguer la fiche de données de sécurité.

b. Sélectionner la langue du document.

c. Cliquer sur Search (Rechercher).

3. Pour afficher, télécharger ou imprimer le document requis :

a. Effectuer un clic droit sur le titre du document.

b. Sélectionner :

•Open (Ouvrir) pour afficher le document

•Save Target As (Enregistrer la cible sous) pour télécharger une version

PDF du document vers n’importe quel emplacement

•Print Target (Imprimer la cible) pour imprimer le document

4. Pour recevoir une fiche de données de sécurité par télécopie ou par courrier

électronique, procéder comme suit dans la page Search Results (Résultats de la

recherche) :

a. Sélectionner Fax ou Email (Courrier électronique) sous le titre du document.

b. Cliquer sur RETRIEVE DOCUMENTS (Obtenir les documents) à la fin de

la liste de documents.

c. Entrer les informations requises.

d. Cliquer sur View/Deliver Selected Documents Now (Afficher/Envoyer les

documents sélectionnés maintenant).

Remarque : Pour obtenir la fiche de données de sécurité des produits chimiques non

distribués par Applied Biosystems, contacter le fabricant.

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Thermo Fisher Scientific Applied Biosystems StepOne™ Système Le manuel du propriétaire

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