3M Petrifilm™ Yeast and Mold Count Plates Mode d'emploi

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Date de parution : 2015-06

Instructions relatives au produit

Test pour la numération des Levures et Moisissures

Description

Le Test 3M™ Petrilm™ pour la numération des Levures et des Moisissures (YM) est un milieu de culture prêt à l’emploi

qui contient des éléments nutritifs, des antibiotiques, un agent géliant soluble dans l’eau froide et un indicateur qui

facilite la numération des levures et des moisissures. Les Tests 3M Petrilm YM sont utilisés aux ns de numération

des levures et moisissures dans l’industrie des aliments et des boissons. Les composants du Test 3M Petrilm YM sont

décontaminés, mais pas stérilisés. Les Tests 3M™ Petrilm™ sont fabriqués dans un site certié ISO (International

Standards Organization) 9001.

Consignes de Sécurité

L’utilisateur doit lire attentivement, comprendre et respecter toutes les consignes de sécurité fournies dans le mode

d’emploi du Test 3M Petrilm YM. Conserver ces consignes de sécurité pour référence ultérieure.

AVERTISSEMENT Indique une situation dangereuse qui, si elle n’est pas évitée, pourrait entraîner un décès, des

blessures graves et/ou des dommages matériels.

MISE EN GARDE Indique une situation dangereuse qui, si elle n’est pas évitée, pourrait entraîner des blessures

mineures à modérées et/ou des dommages matériels.

W AVERTISSEMENT

An de réduire les risques associés à la diusion de produits contaminés:

• Utiliser les Tests 3M Petrilm YM pour les analyses des échantillons d’aliments et de boissons que vous avez

validées.

• Suivre les instructions concernant le stockage des produits fournies dans ces instructions relatives au produit.

• Ne pas utiliser au-delà de la date de péremption.

An de réduire les risques associés aux mauvais diagnostics cliniques:

• Ne pas utiliser les Tests 3M Petrilm YM pour faire des diagnostics sur l’homme ou l’animal.

MISE EN GARDE

An de réduire les risques associés à l’exposition aux dangers biologiques et à la pollution de l’environnement:

• Suivre les normes industrielles actuelles ainsi que la réglementation locale pour le traitement des déchets

contaminés.

An de réduire les risques associés à une mauvaise interprétation des résultats:

• Les Tests 3M Petrilm YM ne font pas de distinction entre une souche de levures ou de moisissures et une autre.

• 3M n’a pas documenté l’utilisation des Tests 3M Petrilm YM dans des secteurs autres que l’industrie alimentaire et

les boissons. 3M n’a, par exemple, pas documenté l’utilisation des Tests 3M Petrilm YM pour l’analyse de l’eau, des

produits pharmaceutiques ou des cosmétiques.

• Les Tests 3M Petrilm YM n’ont été testés ni avec la totalité des produits alimentaires, processus de transformation

alimentaire et protocoles d’analyse, ni avec la totalité des souches de levures et de moisissures.

• Ne pas utiliser les Tests 3M Petrilm YM pour faire des diagnostics sur l’homme ou l’animal.

• L’utilisateur doit former son personnel à des techniques d’analyse appropriées. Par exemple, aux bonnes pratiques

de laboratoire

1

, ISO 7218

2

ou ISO 17025

3

.

Consulter la che de données de sécurité du produit pour plus de renseignements.

Pour obtenir une documentation sur la performance de ce produit, veuillez consulter notre site Internet

www.3M.com/foodsafety ou contacter un représentant ou distributeur 3M local.

Responsabilité de L’utilisateur

Il incombe aux clients et aux utilisateurs de connaître les instructions et les informations. Veuillez visiter notre site

www.3M.com/foodsafety pour consulter les instructions les plus récentes ou contacter votre représentant ou distributeur 3M.

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Lors du choix d’une méthode de test, il est important d’admettre que des facteurs externes comme les méthodes

d’échantillonnage, lesprotocoles de test, la préparation des échantillons, la manipulation et les techniques de laboratoires

peuvent inuencer les résultats.

Il incombe à l’utilisateur de sélectionner une méthode d’analyse pour évaluer un nombre susant d’échantillons avec les

matrices et les épreuves microbiennes appropriées an de garantir que la méthode d’analyse réponde aux critères de

l’utilisateur.

Il incombe également à l’utilisateur de déterminer si une méthode d’analyse et ses résultats répondent aux exigences de

ses clients ou fournisseurs.

Comme avec n’importe quelle méthode de test, les résultats obtenus avec ce produit ne constituent pas une garantie de la

qualité des matrices ou des processus testés.

Limitation de garantie/Limites de Recours

SAUF SI EXPRESSÉMENT ÉTABLI DANS LA SECTION DE GARANTIE LIMITÉE D’UN EMBALLAGE DE PRODUIT

INDIVIDUEL, 3M RENONCE À TOUTE GARANTIE EXPLICITE ET IMPLICITE, Y COMPRIS, MAIS SANS S’Y LIMITER,

TOUTE GARANTIE DE COMMERCIALISATION OU D’ADAPTATION POUR UN USAGE SPÉCIFIQUE. En cas de défaut de

tout produit de Sécurité Alimentaire 3M, 3M ou son distributeur agréé s’engage, à son entière discrétion, au remplacement

ou au remboursement du prix d’achat du produit. Il s’agit de vos recours exclusifs. Tout défaut supposé du produit devra

être notié à 3M dans un délai de soixante jours et le produit renvoyé au fournisseur. Veuillez appeler le Service clientèle

(1-800-328-1671 aux États-Unis) ou votre représentant 3M en produits de microbiologie pour obtenir une autorisation de

renvoi.

Limitation de Responsabilité de 3M

3M NE SERA PAS TENUE RESPONSABLE DES PERTES OU DES DOMMAGES ÉVENTUELS, QU’ILS SOIENT DIRECTS,

INDIRECTS, SPÉCIFIQUES, ACCIDENTELS OU CONSÉCUTIFS, Y COMPRIS, MAIS SANS S’Y LIMITER, LES PERTES DE

PROFITS. En aucun cas et en aucune manière, laresponsabilité de 3Ms ne sera engagée au-delà du prix d’achat du produit

prétendu défectueux.

Stockage

Conserver les poches de Tests 3M Petrilm YM non ouvertes, réfrigérées ou congelées, à des températures ≤8°C

(46°F). Les laisser atteindre la température ambiante avant de les ouvrir. Replacer les Tests 3M Petrilm YM non

utilisés dans leur poche. Refermer hermétiquement les poches ouvertes avec un ruban adhésif. Ne pas réfrigérer

les poches ouvertes pour éviter une exposition à l’humidité. Les poches rescellées doivent être conservées dans un

endroit frais et sec un mois au maximum. Lorsque la température d’un laboratoire dépasse 25°C (77°F) et/ou que ce

laboratoire est situé dans une région où l’humidité relative dépasse 50% (à l’exception des locaux climatisés), il est

recommandé de conserver les poches de Tests 3M Petrilm YM refermées au congélateur, comme indiqué ci-dessous.

Pour conserver les poches ouvertes dans un congélateur, placer les Tests 3M Petrilm YM dans un récipient étanche.

Pour utiliser des Tests 3M Petrilm YM congelés, sortir les tests à utiliser de leur récipient et remettre immédiatement

les tests restants dans le congélateur, après les avoir replacés dans le récipient étanche. Les Tests 3M Petrilm YM ne

doivent pas être utilisés après leur date de péremption. Le congélateur utilisé pour la conservation des poches ouvertes

ne doit pas posséder de cycle de dégivrage automatique; en eet, les tests pourraient être endommagés en raison

d’une exposition répétée à l’humidité.

Ne pas utiliser les tests présentant une altération de la couleur. La date limite d’utilisation et le numéro de lot gurent

sur chaque poche de Tests 3M Petrilm. Le numéro de lot est également indiqué sur chaque test.

Mise au Rebut

Après utilisation, les Tests 3M Petrilm YM peuvent contenir des micro-organismes susceptibles de présenter un risque

biologique potentiel. Respecter les normes en vigueur concernant l’élimination des déchets.

Pour toute information relative aux risques biologiques potentiels, se reporter au document Biosafety in Microbiological

and Biomedical Laboratories (Sécurité biologique dans les laboratoires de microbiologie et les laboratoires

biomédicaux), 5

e

édition, SectionVIII-B: agents fongiques ou équivalents.

Instructions D’utilisation

Suivre attentivement l’ensemble des instructions relatives au produit. Dans le cas contraire, les résultats obtenus

risquent d’être inexacts.

Porter des tenues de protection adaptées et respecter les bonnes pratiques de sécurité en laboratoire (BPL).

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Préparation de l’échantillon

1. Au besoin, préparer des dilutions de l’échantillon appropriées.

Utiliser des diluants stériles appropriés:

Tampon phosphate Buttereld

2

, eau peptonée à 0,1%, diluant peptone-sel

3

, solution saline (0,85 – 0,90%),

bouillon de Letheen sans bisulte ou eau distillée. Ne pas utiliser de diluants contenant du citrate, du bisulte ou

du thiosulfate avec les Tests 3M Petrilm YM, car ils peuvent inhiber la croissance des bactéries. Si une solution

tampon au citrate est indiquée dans la procédure standard, la remplacer par l’un des tampons cités plus haut,

réchaué à une température de 40 à 45°C.

2. Mélanger ou homogénéiser l’échantillon.

Test

1. Placer le Test 3M Petrilm YM sur une surface de travail plane et régulière.

2. Soulever le lm supérieur et déposer 1ml d’échantillon dilué au centre du lm inférieur.

3. Abaisser le lm supérieur sur l’échantillon.

4. Placer le 3M™ Petrilm™ YM Diuseur au centre du test. Répartir l’échantillon uniformément en exerçant une

légère pression au centre du diuseur. Répartir l’inoculum sur la totalité de la zone de croissance du Test 3M

Petrilm YM avant que le gel ne se forme. Ne pas faire glisser le diuseur sur le lm.

5. Retirer le diuseur et laisser le test reposer durant au moins une minute an de laisser le gel se former.

Incubation

Laisser incuber les Tests 3M Petrilm YM à l’horizontale, avec le lm transparent vers le haut, en veillant à ne pas

empiler plus de 20tests. Incuber les Tests 3M Petrilm YM selon les recommandations indiquées dans les méthodes de

référence locales en vigueur.

Par exemple, la méthode AOAC® Ocial Method

SM

997.02, Numération des levures et des moisissures dans les

aliments, Méthode du lm sec réhydratable (méthode Petrilm): incuber les Tests 3M Petrilm YM pendant 5jours à

20-25ºC.

Interprétation

1. Le dénombrement à l’aide des Tests 3M Petrilm YM peut se faire sur un compteur de colonies standard ou au

moyen d’une autre source de lumière intense. Les quadrillages sont rendus visibles par un rétro-éclairage qui permet

de faciliter leur dénombrement estimatif.

2. Pour diérencier les colonies de levures et de moisissures sur un Test 3M Petrilm YM, observer la présence d’une

ou de plusieurs des caractéristiques suivantes:

Levures Moisissures

Petites colonies Grandes colonies

Colonies aux contours bien dénis Colonies aux contours ous

Coloration rose à bleu-gris Couleur variable

Colonies bombées («3D») Colonies apparaissant aplaties

Colonies à la couleur uniforme Colonies au centre foncé

3. Faire la numération nale des levures et des moisissures le 5

e

jour. Les moisissures de grande taille ou à la

croissance rapide peuvent gêner la lecture des résultats le 5

e

jour sur le Test 3M Petrilm YM. Observer les tests

le 3

e

jour, noter les résultats des tests comportant un nombre élevé de colonies (le nombre de colonies peut être

noté directement sur le test). Si le test est illisible le 5

e

jour, enregistrer le résultat obtenu le 3

e

jour comme une

numération estimée.

4. Les colonies de moisissures peuvent s’étaler et provoquer le virage complet de la zone de croissance au bleu, noir,

jaune, etc. Dans ce cas, enregistrer le résultat obtenu le 3

e

jour comme une numération estimée.

5. Un nombre élevé de colonies de levures peut provoquer le virage au bleu de la zone de croissance ou l’apparition

d’une zone bleue aux limites de la zone inoculée. Si aucune croissance n’est visible sur le Test 3M Petrilm

YM, soulever le lm supérieur et observer le gel qui adhère sur le lm supérieur. Si de nombreuses levures

sont présentes, vous pourrez voir des colonies blanches sur le gel. Ceci est alors enregistré comme un résultat

incomptable.

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6. La zone de croissance circulaire est de 30cm

2

environ. Des estimations sont possibles sur les tests contenant plus

de 150colonies en comptant le nombre de colonies dans un ou plusieurs carrés représentatifs et en déterminant le

nombre moyen par carré. Multiplier ce nombre moyen par 30 pour déterminer le nombre estimé par test.

7. Si une numération plus précise est demandée, diluer davantage avant d’ensemencer le test.

8. Le Test 3M Petrilm YM contient un indicateur de phosphatase permettant de détecter les levures et les

moisissures. Toutes les cellules vivantes contiennent de la phosphatase; c’est pourquoi la phosphatase naturelle de

l’échantillon peut faire réagir l’indicateur de deux manières:

a) Une couleur de fond bleue uniforme (souvent observée chez les organismes utilisés dans les produits cultivés).

b) Des petits points d’un bleu intense (souvent observés sur les épices ou les produits granulés).

9. Une ou plusieurs des techniques suivantes peuvent permettre de distinguer la réaction colorée due à la phosphatase

naturelle de celle due aux colonies de levures et de moisissures:

a) Diluer davantage l’échantillon

b) Faire sédimenter les particules alimentaires, puis ensemencer le surnageant

c) Observer le test après 24-48heures d’incubation et noter la présence éventuelle d’une réaction colorée.

Si l’intensité de la couleur n’a pas changé après 5jours d’incubation, la couleur peut être due à la réaction

phosphatase.

10. Si nécessaire, les colonies peuvent être isolées pour être identiées. Soulever le lm supérieur et prélever la colonie

de la surface du gel. Utiliser les procédures standard d’analyse.

11. Si les tests ne peuvent pas être lus à la n de la période d’incubation de 5jours, les stocker pour une numération

ultérieure en les congelant, dans un récipient étanche, à une température inférieure ou égale à -15°C, pendant une

semaine au maximum.

Pour plus d’informations, consulter le «Guide d’interprétation du Test 3M™ Petrilm™ pour la numération des Levures

et des Moisissures». Pour toute question concernant des applications ou procédures spéciques, veuillez consulter

notre site Internet à l’adresse www.3M.com/foodsafety ou contacter votre représentant ou distributeur 3M Sécurité

Alimentaire local.

Références

1. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice for

Nonclinical Laboratory Studies.

2. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stus - General requirements and guidance for microbiological

examinations.

3. ISO/IEC17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.

Se reporter aux versions en cours de validité des méthodes normalisées citées plus haut.

Explication des symboles

www.3M.com/foodsafety/symbols

AOAC est une marque déposée d’AOAC INTERNATIONAL

Ocial Methods of Analysis est un service déposé d’AOAC INTERNATIONAL

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