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Sandra von Minden

Roland Meißner

Thomas Zander

HRB 5679

Steuer-Nr. 244/133/00130

UST-ID-Nr. DE 189 016 086

Version 1.

1, 2019-07-04

NADAL® Mononucleosis Test

(test cassette)

REF 252017N-05

Gebrauchsanweisung 2

Instructions for use 6

Instructions d’utilisation 9

Instrucciones de uso 13

Istruzioni per l’uso 17

Sposób użycia 21

Instruções de Utilização 25

Návod k použití 29

Käyttöohje 32

Användarinstruktioner 35

Bruksanvisning 38

Symbols 43

Our Teams 44

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NADAL® Mononucleosis Test (Ref. 252017N-05)

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1. Verwendungszweck und Anwendungsbereich

Der NADAL® Mononucleosis Test ist ein schneller, chromato-

graphischer Immunoassay für den qualitativen Nachweis von

heterophilen Antikörpern gegen Epstein-Barr-Virus (EBV) in

humanem Vollblut, Serum oder Plasma. Der Test ist als

Hilfsmittel bei der Diagnose einer infektiösen Mononukleose

(IM) bestimmt, und nur für den professionellen Gebrauch

ausgelegt.

2. Einleitung und Diagnostische Bedeutung

Infektiöse Mononukleose (IM) wird durch das Epstein-Barr-

Virus (EBV) verursacht, das zur Familie der Herpesviren gehört.

Symptome bei IM sind Fieber, Halsschmerzen und

geschwollene Lymphdrüsen. In sehr seltenen Fällen kommen

Herzprobleme oder Probleme des zentralen Nervensystems

vor. Die Diagnose von IM erfolgt auf Basis der Anwesenheit

von heterophilen anti-EBV-Antikörpern. Heterophile anti-EBV-

Antikörper gehören zur IgM-Klasse. Sie sind bei 80-90% der

akuten IM-Fälle vorhanden und können bei 60-70% der

Patienten während der ersten Woche der klinischen

Erkrankung nachgewiesen werden.

1,2,3,4

Der NADAL® Mononucleosis Test ist ein einfacher Test, der

einen Extrakt aus Rindererythrozyten verwendet, um

heterophile anti-EBV-Antikörper qualitativ und selektiv in

wenigen Minuten im Vollblut, Serum oder Plasma

nachzuweisen.

3. Testprinzip

Der NADAL® Mononucleosis Test ist ein Immunoassay im

Lateral-Flow-Format für den qualitativen Nachweis von

heterophilen Antikörpern gegen Epstein-Barr-Virus (EBV) im

Vollblut, Serum oder Plasma.

Bei diesem Test sind aus Rindererythrozyten extrahierte

Antigene im Testlinienbereich der Testkassette immobilisiert.

Während der Testung reagiert die Probe mit weiteren aus

Rindererythrozyten extrahierten Antigenen, welche auf

Partikel beschichtet und auf dem Konjugat-Pad aufgetragen

sind. Dieses Gemisch wandert chromatographisch die

Membran entlang und interagiert mit den immobilisierten

Antigenen. Wenn die Probe heterophile anti-EBV-Antikörper

enthält, erscheint eine farbige Linie im Testlinienbereich und

weist auf ein positives Ergebnis hin. Wenn die Probe keine

heterophilen anti-EBV-Antikörper enthält, wird im Testlinien-

bereich keine farbige Linie ausgebildet und damit liegt ein

negatives Ergebnis vor.

Als Verfahrenskontrolle muss im Kontrolllinienbereich immer

eine farbige Linie erscheinen, die bestätigt, dass ein

ausreichendes Probenvolumen verwendet wurde und die

Membran ausreichend durchnässt ist.

4. Bestandteile der Testpackung

 5 NADAL® Mononucleosis Testkassetten inkl. Einweg-

pipetten

 1 Puffer „Buffer“

 1 Positivkontrolle „Positive Control“ (verdünntes Human-

plasma, das heterophile anti-EBV-Antikörper enthält, 0,09%

Natriumazid)

 1 Negativkontrolle „Negative Control” (verdünntes Human-

plasma, 0,09% Natriumazid)

 1 Gebrauchsanweisung

5. Zusätzlich benötigte Materialien

 Probensammelbehälter

 Zentrifuge (nur für Serum/Plasma)

 Timer

 Lanzette (nur für Vollblut aus Fingereinstich)

 ggf. Kapillarröhrchen mit Hütchen (nur für Vollblut aus

Fingereinstich)

6. Haltbarkeit und Lagerung der Reagenzien

Test-Kits sollten bei 2-30°C gelagert und bis zum auf der

Verpackung angegebenen Verfallsdatum benutzt werden.

Testkassetten sind bis zum auf Folienbeuteln angegebenen

Verfallsdatum stabil. Testkassetten sollten bis zur Verwendung

in verschlossenen Folienbeuteln verbleiben. Frieren Sie Tests

nicht ein. Verwenden Sie die Tests nicht nach dem

Verfallsdatum.

7. Warnungen und Vorsichtsmaßnahmen

 Nur für den professionellen in-vitro-diagnostischen

Gebrauch.

 Lesen Sie die komplette Gebrauchsanweisung vor der Test-

durchführung sorgfältig durch.

 Den Test nicht nach dem auf der Verpackung angegebenen

Verfallsdatum verwenden.

 Test nicht verwenden, wenn der Folienbeutel beschädigt ist.

 Tests nicht wiederverwenden.

 Proben nicht in das Reaktionsfeld (Ergebnisfeld) geben.

 Das Reaktionsfeld (Ergebnisfeld) nicht berühren, um

Kontaminierung zu vermeiden.

 Zur Vermeidung von Kreuzkontaminationen sollte für jede

Probe ein eigener Probensammelbehälter verwendet

werden.

 Essen, trinken oder rauchen Sie nicht in dem Bereich, in

dem mit Proben und Test-Kits umgegangen wird.

 Tragen Sie beim Umgang mit Proben Schutzkleidung wie

Laborkittel, Einmalhandschuhe und Schutzbrille.

 Behandeln Sie alle Proben so, als ob sie infektiöse

Reagenzien enthielten. Beachten Sie bestehende Vorsichts-

maßnahmen für mikrobiologische Risiken während aller

Verfahren sowie Standardrichtlinien für die korrekte

Probenentsorgung.

 Dieser Test enthält Erzeugnisse tierischen Ursprungs.

Zertifizierte Kenntnisse der Herkunft und/oder des Sanitär-

zustands der Tiere gewährleisten nicht völlig die Abwesen-

heit übertragbarer Pathogene. Es wird daher empfohlen,

diese Produkte als potentiell infektiös zu betrachten und sie

gemäß den üblichen Sicherheitsvorkehrungen zu behandeln

(z.B. Verschlucken oder Einatmen vermeiden).

 Feuchtigkeit und Temperaturen können Testergebnisse

beeinträchtigen.

 Benutzte Testmaterialien sollten gemäß lokalen Vorgaben

entsorgt werden.

8. Probennahme, -vorbereitung und -lagerung

Der NADAL® Mononucleosis Test kann mit Vollblut (aus

Venenpunktur oder Fingerpunktion), Serum oder Plasma

durchgeführt werden.

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Vollblutprobenentnahme durch Venenpunktion

Sammeln Sie Blutproben mit Antikoagulanzien (Natrium- oder

Lithium-Heparin, Kalium- oder Natrium-EDTA, Natriumoxalat,

Natriumcitrat) nach Standard-Laborverfahren.

Vollblutprobenentnahme durch Fingerpunktion

Waschen Sie die Hand des Patienten mit Seife und warmem

Wasser oder säubern Sie sie mit einem Alkoholtupfer.

Lassen Sie sie trocknen.

Massieren Sie die Hand ohne dabei die vorgesehene

Einstichstelle zu berühren, indem Sie die Hand abwärts in

Richtung der Kuppe des Mittel- oder Ringfingers reiben.

Stechen Sie die Haut mit einer sterilen Lanzette. Wischen

Sie das Blutanzeichen ab.

Reiben Sie vorsichtig die Hand vom Handgelenk zur

Handfläche und zum Finger, damit sich auf dem Einstich-

punkt ein runder Tropfen bildet.

Trennen Sie Serum oder Plasma vom Blut so schnell wie

möglich, um eine Hämolyse zu vermeiden. Verwenden Sie nur

klare, nicht hämolysierte Proben.

Die Testung sollte unmittelbar nach der Probenentnahme

durchgeführt werden. Bewahren Sie Proben nicht bei

Raumtemperatur über einen längeren Zeitraum auf. Serum-

und Plasmaproben können bei 2-8°C bis zu 3 Tage gelagert

werden. Für eine längere Lagerung sollten die Proben bei

-20°C gelagert werden. Venöses Vollblut sollte bei 2-8°C

aufbewahrt werden, wenn der Test innerhalb von 2 Tagen

nach Probenentnahme durchgeführt wird. Frieren Sie die

Vollblutproben nicht ein. Vollblutproben aus Fingerpunktion

sollten unverzüglich getestet werden. Bringen Sie Proben vor

der Testdurchführung auf Raumtemperatur. Eingefrorene

Proben sollten vor Testdurchführung vollständig aufgetaut

und gut gemischt werden. Proben sollten nicht wiederholt

eingefroren und aufgetaut werden. Wenn Proben versendet

werden sollen, sollten diese gemäß Bundesverordnungen für

ätiologische Mittel verpackt werden.

9. Testdurchführung

Bringen Sie alle Tests, Puffer, Proben und/oder Kontrollen

vor der Testdurchführung auf Raumtemperatur (15-30°C).

1. Entnehmen Sie die Testkassette dem verschlossenen

Folienbeutel und legen Sie sie auf eine saubere und ebene

Oberfläche. Die Testkassette muss unverzüglich nach der

Öffnung des Folienbeutels verwendet werden. Kenn-

zeichnen Sie die Testkassette mit der Patienten- oder

Kontrollidentifikation.

2. a) Für Serum- oder Plasmapro-

ben:

Halten Sie die Pipette senkrecht

und geben Sie 1 Tropfen (ca.

25 μL) Serum oder Plasma in die

Probenvertiefung (S) der Testkas-

sette.

b) Für Vollblutproben aus Venen-

punktion

Halten Sie die Pipette senkrecht

und geben Sie 2 Tropfen (ca.

50 μL) Vollblut in die Probenver-

tiefung (S) der Testkassette.

c) Für Vollblutproben aus Finger-

punktion

Entnehmen Sie mit der Kapillare eine

Blutprobe bis sich das Kapillarröhr-

chen etwa mit ca. 50 μL Blut gefüllt

hat. Vermeiden Sie Luftblasen. Stül-

pen Sie das Hütchen über das obere

Ende des Kapillarröhrchens und

drücken Sie es, um die Vollblutprobe

in die Probenvertiefung (S) der Test-

kassette zu geben.

3. Halten Sie das Pufferfläschchen

senkrecht und geben Sie 1 Tropfen

(ca. 55 μL) Puffer hinzu.

4. Starten Sie den Timer.

5. Warten Sie darauf, dass die farbige(n)

Linie(n) erscheint/en. Werten Sie das

Ergebnis nach 5 Minuten aus. Nach

mehr als 10 Minuten keine Ergebnisse

mehr auswerten.

10. Testauswertung

Positiv

Zwei farbige Linien erscheinen auf der

Membran. Eine Linie erscheint im

Kontrolllinienbereich (C), die andere

Linie erscheint im Testlinienbereich (T).

Hinweis:

Die Farbintensität im Testlinienbereich (T) kann abhängig von

der Konzentration der anti-EBV-Antikörper, die in der Probe

vorhanden sind, variieren. Daher sollte jede Farbtönung im

Testlinienbereich (T) als positives Ergebnis betrachtet werden.

Negativ

Es erscheint eine farbige Linie im

Kontrolllinienbereich (C). Im Testlinien

bereich (T) erscheint keine farbige Linie.

Ungültig

Die Kontrolllinie (C) erscheint nicht.

Ergebnisse von den Tests, die nach der

festgelegten Auswertezeit keine Kon-

trolllinie gebildet haben, müssen

verworfen werden. Überprüfen Sie den

Verfahrensablauf und wiederholen Sie

die Testung mit einer neuen Test-

kassette. Falls das Problem weiter-

besteht, verwenden Sie das Test-Kit bitte

nicht weiter und setzen Sie sich mit

Ihrem Distributor in Verbindung.

Ungenügendes Probenvolumen, abgelaufene Tests oder

fehlerhafte Vorgehensweise sind die wahrscheinlichsten

Ursachen dafür, dass die Kontrolllinie nicht erscheint.

11. Qualitätskontrolle

Die Testkassette beinhaltet eine interne Verfahrenskontrolle:

Eine im Kontrolllinienbereich (C) erscheinende farbige Linie

wird als interne Verfahrenskontrolle betrachtet. Sie bestätigt

ausreichendes Probenvolumen, eine korrekte Verfahrens-

technik und dass die Membran ausreichend durchnässt ist.

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Die Gute Laborpraxis (GLP) empfiehlt den Einsatz von Kontroll-

materialien zum Nachweis der einwandfreien Leistung des

Test-Kits.

Durchführung des externen Qualitätskontrolltestes

1. Halten Sie die Fläschchen senkrecht und geben Sie erst 1

Tropfen (ca. 40 µl) der positiven oder negativen

Kontrolllösung in die Probenvertiefung (S) der Testkassette

und dann 1 Tropfen (ca. 55 µl) Puffer.

2. Bei Schritt 4 der Testdurchführung fortfahren.

3. Die Testergebnisse nicht verwenden, wenn die Kontrollen

nicht die erwarteten Ergebnisse erzielen. Wiederholen Sie

den Test oder kontaktieren Sie Ihren Distributor.

12. Grenzen des Tests

 Der NADAL® Mononucleosis Test ist nur für den in-vitro-

diagnostischen Gebrauch bestimmt. Der Test sollte nur zum

Nachweis von Antikörpern gegen Epstein-Barr-Virus in

Vollblut-, Serum- oder Plasmaproben verwendet werden. Es

kann weder ein quantitativer Wert noch ein Anstieg der

Konzentration der anti-EBV-Antikörper mit diesem

qualitativen Test bestimmt werden.

 Der NADAL® Mononucleosis Test zeigt nur das Vorhanden-

sein von anti-EBV-Antikörpern in der Probe an und sollte

nicht das einzige Kriterium bei der Diagnose einer

infektiösen Mononukleose-Infektion sein.

 Wie bei allen diagnostischen Tests sollten alle Ergebnisse

des Schnelltests zusammen mit anderen klinischen

Informationen, die dem Arzt zur Verfügung stehen,

ausgewertet werden.

 Sollte das Testergebnis negativ ausfallen, klinische

Symptome aber weiter anhalten, empfiehlt es sich,

zusätzliche Testungen unter Verwendung anderer, klini-

scher Methoden durchzuführen. Ein negatives Ergebnis

schließt zu keinem Zeitpunkt eine mögliche IM-Erkrankung

an aus.

13. Erwartete Ergebnisse

In 35-50% der berichteten Fälle verursacht das Epstein-Barr

Virus (EBV) bei Jugendlichen oder jungen Erwachsenen

infektiöse Mononukleose (IM).

1,5

Das Vorkommen von EBV-assoziierter IM in den USA wurde

auf 45 pro 100.000 Fälle geschätzt und ist bei Jugendlichen

und jungen Erwachsenen am höchsten – mit etwa 2 von 1.000

Fällen. Bei EBV Infektionen gibt es kein jahreszeitenabhängiges

Muster. Die Inkubationszeit beträgt 10-60 Tage, obwohl bei

Kindern oder Jugendlichen häufig eine Inkubationszeit von 7-

14 Tagen vorkommt.

14. Leistungsmerkmale des Tests

Sensitivität

Der NADAL® Mononucleosis Test wurde mit Proben ausge-

wertet, die mit einem führenden kommerziell erhältlichen

Objektträger-Agglutinationstest als positiv oder negativ

bestätigt wurden. Der Objektträger-Agglutinationstest wurde

als Vergleichsmethode für den NADAL® Mononucleosis Test

verwendet. Das Ergebnis zeigt, dass die Sensitivität des

NADAL® Mononucleosis Tests >99,9% relativ zum Objekt-

träger-Agglutinationstest beträgt.

Spezifität

Der NADAL® Mononucleosis Test verwendet Antigene, die

hochspezifisch für anti-EBV-Antikörper im Vollblut, Serum

oder Plasma sind. Die Ergebnisse zeigen, dass die Spezifität

des NADAL® Mononucleosis Tests 98,9% relativ zum

Objektträger-Agglutinationstest beträgt.

NADAL® Mononucleosis Test vs. Objektträger-Agglutinations-

test.

Objektträger-Agglutinationstest

NADAL®

Mononucleosis

Test

Positiv Negativ Total

Positiv 60 1 61

Negativ 0 89 89

Total 60 90 150

Relative Sensitivität: >99,9% (95,1% - 100%)*

Relative Spezifität: 98,9% (94% - 99,9%)*

Gesamtübereinstimmung: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Konfidenzintervall

Interferierende Substanzen

Negativen und mittel positiven Plasma- und Serumproben (mit

einem ELISA bestätigt) wurden Analyten mit den unten

aufgeführten Konzentrationen zugegeben und in Triplikaten

getestet.

Analyt Konzentration

Ascorbinsäure 20 mg/ml

Hämoglobin 1000 mg/dl

Gentisinsäure 20 mg/dl

Oxalsäure 60 mg/dl

Bilirubin 1000 mg/dl

Harnsäure 20 mg/ml

Acetaminophen 20 mg/dl

Acetylsalicylsäure 20 mg/dl

Methanol 10%

Kreatin 200 mg/dl

Albumin 2000 mg/dl

Coffein 20 mg/dl

Die Analyten zeigten keine Interferenz mit dem NADAL®

Mononucleosis Test. Es gab keine offensichtlichen Unter-

schiede zwischen den Ergebnissen von drei Chargen der Tests.

Genauigkeit

Inter- und Intra-Lot-Variabilität

Drei unabhängige Chargen der NADAL® Mononucleosis Tests

wurden sowohl mit negativen als auch mit niedrig, mittel und

hoch positiven Serum- und Plasmaproben in 10-fach-

Bestimmungen untersucht. Alle Ergebnisse entsprachen den

Erwartungen. Innerhalb der 10-fach-Bestimmungen bzw.

zwischen den unterschiedlichen Chargen wurden keine

abweichenden Ergebnisse erhalten.

Kreuzreaktivität

Die auf folgende Parameter positiven Proben wurden mit der

NADAL® Mononucleosis Testkassette getestet:

RF HCV

HBsAg TB

HBeAg HIV

HBeAb Syphilis

HBcAb

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Es wurde keine Kreuzreaktivität festgestellt. Dies zeigt, dass

der NADAL® Mononucleosis Test in hohem Maße spezifisch

auf humane anti-EBV-Antikörper ist.

15. Referenzen

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 OM/UJa

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1. Intended Use

The NADAL® Mononucleosis Test is a rapid, chromatographic

immunoassay for the qualitative detection of heterophile

antibodies to Epstein-Barr virus (EBV) in human whole blood,

serum or plasma. The test is intended for use as an aid in the

diagnosis of infectious mononucleosis (IM) and designed for

professional use only.

2. Introduction and Clinical Significance

Infectious Mononucleosis (IM) is caused by the Epstein-Barr

virus (EBV), which is a member of the herpesvirus family. The

symptoms of IM are: fever, sore throat and swollen lymph

glands. In very rare cases, heart or central nervous system

problems may occur. Diagnosis of IM is made based on the

presence of heterophile anti-EBV antibodies. Heterophile anti-

EBV antibodies belong to the IgM class. They are present in

80-90% of acute IM cases and can be detected in 60-70% of

patients during the first week of clinical illness.

1,2,3,4

The NADAL® Mononucleosis Test is a simple test that utilises

an extract of bovine erythrocytes to qualitatively and

selectively detect heterophile anti-EBV antibodies in whole

blood, serum or plasma in just minutes.

3. Test Principle

The NADAL® Mononucleosis Test is a lateral flow

immunoassay for the qualitative detection of heterophile

antibodies to Epstein-Barr virus (EBV) in whole blood, serum

or plasma.

In this test, antigens extracted from bovine erythrocytes are

immobilised in the test line region of the test cassette. During

testing, the specimen reacts with further antigens extracted

from bovine erythrocytes and precoated onto particles which

have been applied to the conjugate pad. The mixture migrates

chromatographically along the membrane and interacts with

the immobilised antigens. If the specimen contains

heterophile anti-EBV antibodies, a coloured line will appear in

the test line region, indicating a positive result. If the

specimen contains no heterophile anti-EBV antibodies, no

coloured line will appear in the test line region, indicating a

negative result.

To serve as a procedural control, a coloured line should always

appear in the control line region (C), indicating that a proper

volume of specimen has been added and membrane wicking

has occurred.

4. Reagents and Materials Supplied

 5 NADAL® Mononucleosis test cassettes incl. disposable

pipettes

 1 buffer

 1 positive control (diluted human plasma containing

heterophile anti-EBV antibodies, 0.09% sodium azide)

 1 negative control (diluted human plasma, 0.09% sodium

azide)

 1 package insert

5. Additional Materials Required

 Specimen collection containers

 Centrifuge (for serum/plasma)

 Timer

 Lancet (for fingerstick whole blood only)

 If necessary, heparinised capillary tubes and dispensing bulb

(for fingerstick whole blood only)

6. Storage & Stability

Test kits should be stored at 2-30°C and used before the expiry

date printed on the packaging. Test cassettes are stable until

the expiration date printed on foil pouches. Test cassettes

should remain in sealed pouches until use. Do not freeze tests.

Do not use tests beyond the expiration date.

7. Warnings and Precautions

 For professional in-vitro diagnostic use only.

 Carefully read through the test procedure prior to testing.

 Do not use the test beyond the expiration date indicated on

the package.

 Do not use the test if the foil pouch is damaged.

 Do not reuse tests.

 Do not add samples to the reaction area (result area).

 In order to avoid contamination, do not touch the reaction

area (result area).

 Avoid cross-contamination of specimens by using a new

specimen collection container for each specimen obtained.

 Do not eat, drink or smoke in the area where specimens

and test kits are handled.

 Wear protective clothing such as laboratory coats,

disposable gloves and eye protection when specimens are

being assayed.

 Handle all specimens as if they contain infectious agents.

Observe established precautions for microbiological risks

throughout all procedures and standard guidelines for the

appropriate disposal of specimens.

 The test kit contains products of animal origin. Certified

knowledge of the origin and/or sanitary state of the animals

does not completely guarantee the absence of transmissible

pathogenic agents. It is therefore recommended that these

products be treated as potentially infectious, and handled

in accordance with usual safety precautions (e.g., do not

ingest or inhale).

 Humidity and temperature can adversely affect test results.

 Used testing materials should be discarded according to

local regulations.

8. Specimen Collection and Preparation

The NADAL® Mononucleosis Test can be performed using

whole blood (from venipuncture or fingerstick), serum or

plasma.

To collect venipuncture whole blood specimens:

Collect blood specimens with anticoagulants (sodium or

lithium heparin, potassium or sodium EDTA, sodium oxalate,

sodium citrate) following standard laboratory procedures.

To collect fingerstick whole blood specimens:

 Wash the patient’s hand with soap and warm water or

clean it with an alcohol swab. Allow it to dry.

 Massage the hand without touching the intended puncture

site by rubbing down the hand towards the fingertip of the

middle or ring finger.

 Puncture the skin with a sterile lancet. Wipe away the first

sign of blood.

 Gently rub the hand from wrist to palm to finger to form a

rounded drop of blood over the puncture site.

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Separate serum or plasma from blood as soon as possible to

avoid haemolysis. Use only clear, non-haemolysed specimens.

Testing should be performed immediately after specimen

collection. Do not leave specimens at room temperature for

prolonged periods of time. Serum and plasma specimens can

be stored at 2-8°C for up to 3 days. For long-term storage,

specimens should be kept below -20°C. Whole blood collected

by venipuncture should be stored at 2-8°C if the test is to be

run within 2 days of collection. Do not freeze whole blood

specimens. Fingerstick whole blood should be tested

immediately. Bring specimens to room temperature prior to

testing. Frozen specimens should be completely thawed and

mixed well prior to testing. Specimens should not be frozen

and thawed repeatedly. If specimens are to be shipped, they

should be packed in compliance with federal regulations for

transportation of etiologic agents.

9. Test Procedure

Bring tests, buffer, specimens and/or controls to room

temperature (15-30°C) prior to testing.

1. Remove the test cassette from the sealed foil pouch and

place it on a clean and level surface. The test cassette

should be used immediately after opening the foil pouch.

Label the test cassette with the patient or control

identification.

2. a) For serum or plasma specimen:

Holding the dropper vertically, add

1 drop (approximately 25 μL) of

serum or plasma to the sample well

(S) of the test cassette.

b) For venipuncture whole blood

specimen:

Holding the dropper vertically, add

2 drops (approximately 50 μL) of

whole blood to the sample well (S) of

the test cassette.

c) For fingerstick whole blood

specimen:

Apply the end of the capillary tube to

the blood until it is filled with

approximately 50 μL. Avoid air

bubbles. Place the bulb onto the top

end of the capillary tube and squeeze

the bulb to dispense the whole blood

specimen into the sample well (S) of

the test cassette.

3. Holding the buffer bottle vertically,

add 1 drop (approximately 55 μL) of

buffer to the sample well (S).

4. Start the timer.

5. Wait for the coloured line(s) to

appear. Read the result after 5

minutes. Do not interpret the result

after more than 10 minutes.

10. Result Interpretation

Positive:

Two coloured lines appear on the

membrane. One line appears in the

control line region (C) and the other line

appears in the test line region (T).

Note:

The colour intensity in the test line region (T) may vary

depending on the concentration of anti-EBV antibodies

present in the specimen. Therefore, any shade of colour in the

test line region (T) should be considered positive.

Negative:

One coloured line appears in the control

line region (C). No apparent coloured

line appears in the test line region (T).

Invalid:

The control line (C) fails to appear.

Results from any test which has not

produced a control line at the specified

reading time must be discarded. Please

review the procedure and repeat the

test with a new test cassette. If the

problem persists, discontinue using the

test kit immediately and contact your

distributor.

Insufficient specimen volume, incorrect operating procedure

or expired tests are the most likely reasons for the control line

failure.

11. Quality Control

An internal procedural control is included in the test cassette:

A coloured line appearing in the control line region (C) is

considered an internal procedural control. It confirms

sufficient specimen volume, adequate membrane wicking and

correct procedural technique.

Good laboratory practice (GLP) recommends the use of

control materials to ensure proper test kit performance.

Procedure for External Quality Control Testing

1. Holding each bottle vertically, add 1 drop (approximately

40 μL) of positive or negative control solution to the sample

well (S) of the test cassette. Then, holding the bottle

vertically, add 1 drop (approximately 55 μL) of buffer to the

sample well (S).

2. Continue with step 4 of ‘Test Procedure’.

3. If the controls do not yield the expected results, do not use

the obtained results. Repeat the test or contact your

distributor.

12. Limitations

 The NADAL® Mononucleosis Test is for in-vitro diagnostic

use only. The test should only be used for the detection of

anti-EBV antibodies in whole blood, serum or plasma

specimens. Neither the quantitative value nor the rate of

increase in concentration of anti-EBV antibodies can be

determined by this qualitative test.

 The NADAL® Mononucleosis Test only detects the presence

of anti-EBV antibodies in specimen and should not be used

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as the sole criterion for diagnosis of infectious

mononucleosis infection.

 As with all diagnostic tests, all results obtained with this test

should be interpreted in conjunction with other clinical

information available to the physician.

 If the test result is negative and clinical symptoms persist,

additional testing using other clinical methods is

recommended. A negative result does not at any time

preclude the possibility of IM infection.

13. Expected Results

Infection with Epstein-Barr virus (EBV) during adolescence or

young adulthood causes infectious mononucleosis (IM) in 35%

to 50% of reported cases.

1,5

The incidence of EBV-associated IM

in the USA has been estimated at 45 per 100,000 and is the

highest in adolescent and young adults - roughly 2 out of

1,000. No seasonal pattern of EBV infection exists. The

incubation period is 10 to 60 days, though the incubation

period of 7 to 14 days is common amongst children and

adolescents.

14. Performance Characteristics

Sensitivity

The NADAL® Mononucleosis Test has been evaluated with

specimens confirmed positive or negative by a leading,

commercially-available slide agglutination test. The slide

agglutination test served as a reference method for the

NADAL® Mononucleosis Test. The result shows that the

sensitivity of the NADAL® Mononucleosis Test is >99.9%

relative to the slide agglutination test.

Specificity

The NADAL® Mononucleosis Test uses antigens that are highly

specific for anti-EBV antibodies in whole blood, serum or

plasma. The results show that the specificity of the NADAL®

Mononucleosis Test is 98.9% relative to the slide agglutination

test.

NADAL® Mononucleosis Test vs. slide agglutination test

Slide agglutination test

NADAL®

Mononucleosis

Test

Positive Negative Total

Positive 60 1 61

Negative 0 89 89

Total 60 90 150

Relative sensitivity: >99.9% (95.1% - 100%)*

Relative specificity: 98.9% (94% - 99.9%)*

Overall agreement: 99.3% (96.3% - 99.9%)*

*95% Confidence interval

Interfering substances

Negative and middle positive plasma and serum specimens

(ELISA confirmed) were spiked with the analytes at the

concentrations listed below and tested in triplicate.

Analyte Concentration

Ascorbic acid 20 mg/ml

Haemoglobin 1000 mg/dl

Gentisic acid 20 mg/dl

Oxalic acid 60 mg/dl

Bilirubin 1000 mg/dl

Analyte Concentration

Uric acid 20 mg/ml

Acetaminophen 20 mg/dl

Acetylsalicylic acid 20 mg/dl

Methanol 10%

Creatine 200 mg/dl

Albumin 2000 mg/dl

Caffeine 20 mg/dl

The analytes showed no interference with the NADAL®

Mononucleosis Test. There were no obvious differences

among the results obtained with three lots of tests.

Precision

Inter- and intra-lot variability

Three independent lots of the NADAL® Mononucleosis Tests

were tested with negative as well as low, medium and high

positive serum and plasma specimens in 10-fold

determinations. All results matched the expectations. No

deviating results were obtained within the 10-fold

determinations or between the different lots.

Cross-reactivity

Samples, positive for the following parameters were tested

with the NADAL® Mononucleosis Test:

RF HCV

HbsAg TB

HbeAg HIV

HbeAb Syphilis

HbcAb

No cross-reactivity was observed indicating that the NADAL®

Mononucleosis Test has a high degree of specificity for human

anti-EBV antibodies.

15. References

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 OM/UJa

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1. Domaine d’application

Le test rapide NADAL® Mononucleosis est un immunodosage

chromatographique pour la détection qualitative des anticorps

hétérophiles dirigés contre le virus de l'Epstein-Barr dans les

échantillons de sang total, de sérum ou de plasma. Le test est

une aide au diagnostic de la mononucléose infectieuse. Il est

réservé à un usage professionnel.

2. Introduction et signification clinique

La mononucléose infectieuse (MNI) est une maladie

provoquée par le virus Epstein-Barr (EBV). L'EBV fait partie de

la famille des Herpesviridae. Les symptômes de la MNI sont la

fièvre, les maux de gorge et un gonflement des ganglions

lymphatiques. Dans de rares cas, des problèmes cardiaques ou

du système nerveux central peuvent apparaître. Le diagnostic

de la MNI se fait par la détection d'anticorps hétérophiles anti-

EBV. Les anticorps hétérophiles anti-EVB font partie de la

classe des IgM. Les anticorps hétérophiles apparaissent dans

80-90°C des cas aigus et sont détectables chez 60-70% des

patients lors de la première semaine de l'infection.

1,2,3,4

Le test NADAL® Mononucleosis emploie un extrait

d’érythrocytes bovins pour détecter de manière qualitative et

sélective des anticorps hétérophiles dans le sang total, le

sérum ou le plasma en quelques minutes seulement.

3. Principe du test

Le test rapide NADAL® Mononucleosis est un immunodosage

chromatographique pour la détection qualitative des anticorps

hétérophiles dirigés contre le virus de l'Epstein-Barr dans les

échantillons de sang total, de sérum ou de plasma.

Des antigènes d’érythrocytes bovins sont immobilisés au

niveau de la ligne de test (T) de la cassette. L’échantillon réagit

avec les particules antigéniques d’extraits d’érythrocytes

bovins immobilisées sur le tampon de conjugué du test. Ce

mélange migre le long de la membrane et interagit avec les

antigènes immobilisés. Si l’échantillon contient des anticorps

hétérophiles anti-EBV, une ligne de couleur apparaît dans la

zone de test (T). Le résultat est alors positif. Si l’échantillon ne

contient pas d’anticorps hétérophiles anti-EBV, la zone de test

ne présente aucune ligne de couleur, le résultat est alors

négatif.

Une ligne de couleur doit toujours apparaître dans la zone de

contrôle. Cette ligne indique que le volume d'échantillon

utilisé était suffisant et que la membrane a été entièrement

imbibée.

4. Réactifs et matériel fournis

 5 cassettes NADAL® Mononucleosis (pipettes à usage

unique incluses)

 1 solution tampon "Buffer“

 1 flacon de contrôle positif « Positiv Control » (plasma

humain dilué contenant des anticorps hétérophiles anti-

EBV, 0,09% azoture de sodium)

 1 flacon de contrôle négatif « Negativ Control » (plasma

humain dilué, 0,09% azoture de sodium)

 1 notice d'utilisation

5. Matériel supplémentaire nécessaire

 Récipient collecteur

 Centrifugeuse (Sérum/Plasma)

 Chronomètre

 Lancettes (pour sang total recueilli sur le bout du doigt)

 Éventuellement, tubes capillaires avec poire de

prélèvement (pour sang total recueilli au bout du doigt)

6. Péremption et conservation des réactifs

Les kits de test devraient être conservés à une température

ambiante comprise entre 2 et 30°C et utilisés d'ici à la date de

péremption indiquée sur l'emballage. Les cassettes restent

stables jusqu'à la date de péremption indiquée sur

l'emballage. Les cassettes devraient restées dans leur

emballage fermé jusqu'à leur utilisation. Ne pas congeler les

prélèvements. Ne pas utiliser le test au-delà de la date de

péremption.

7. Avertissement et précautions

 Test réservé au diagnostic in-vitro professionnel.

 Lire attentivement la notice d'utilisation avant de réaliser le

test.

 Ne pas utiliser le test après la date de péremption indiquée

sur l'emballage.

 Ne pas utiliser le test si l'emballage est endommagé.

 Test à usage unique.

 Ne pas déposer de prélèvement sur la zone réactive

(fenêtre de résultats).

 Ne pas toucher la zone réactive afin d'éviter toute

contamination.

 Utiliser un collecteur différent pour chaque échantillon afin

d’éviter tout risque de contaminations croisées.

 Ne pas manger, boire ou fumer dans la zone de

manipulation du test.

 Utiliser des vêtements de protection tels qu'une blouse de

laboratoire, des gants à usage unique et des lunettes de

protection.

 Manipuler les échantillons en les considérant comme de

potentiels réactifs infectieux. Respecter les précautions

relatives aux risques microbiologiques pendant les

manipulations ainsi que les directives locales en vigueur

concernant l'élimination des déchets.

 Ce test contient des produits d'origine animale. La

certification concernant l'origine et l'état sanitaire des

animaux ne certifie pas l'absence totale d'agents

pathogènes transmissibles. Tous les prélèvements et

matériaux utilisés pour ce test doivent être considérés

comme des matières infectieuses. Il est recommandé

d'appliquer les mesures de précaution nécessaires (ne pas

avaler ou inhaler).

 L'humidité et les fortes températures peuvent altérer les

résultats du test.

 Les composants du test doivent être éliminés selon les

directives locales en vigueur.

8. Recueil, préparation et conservation des échantillons

Le test NADAL® Mononucleosis peut être réalisé sur des

échantillons de sang total (ponction veineuse ou au bout du

doigt), de sérum et de plasma.

Sang total veineux

Recueillir un échantillon de sang avec un anticoagulant

(héparine de sodium, héparine de lithium, potassium EDTA,

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EDTA-sodium, oxalate de sodium, citrate de sodium) selon les

procédures standards de laboratoire.

Sang total recueilli au bout du doigt

 Laver les mains du patient avec du savon et de l'eau chaude

ou nettoyer soigneusement la zone de piqûre avec un

tampon alcoolisé. Bien sécher la main.

 Masser la main en direction du bout du majeur ou de

l'annulaire. Prendre soin de ne pas entrer en contact avec la

zone de piqûre.

 Piquer le bout du doigt à l'aide d'une lancette stérile.

Essuyer la première goutte de sang.

 Frotter la main du poignet à la paume et au doigt jusqu’à

former une goutte de sang au niveau de la zone de piqûre.

Séparer le sérum et le plasma du sang dès que possible afin

d'éviter toute hémolyse. Utiliser exclusivement des

échantillons clairs et non-hémolysés.

L'analyse devrait être réalisée juste après le recueil des

échantillons. Ne pas conserver les échantillons à température

ambiante pendant une période trop longue. Les échantillons

de sérum et de plasma peuvent être conservés jusqu'à 3 jours

à une température comprise entre 2 et 8°C. Lors d'une

conservation plus longue, conserver les échantillons à -20°C.

Le sang total veineux devrait être conservé à une température

comprise entre 2 et 8°C si le test est réalisé dans les 2 jours qui

suivent le recueil des échantillons. Ne pas congeler les

échantillons de sang total. Les échantillons de sang total

recueillis au bout du doigt devraient être testés dès que

possible. Amener tous les échantillons à température

ambiante avant la réalisation du test. Les échantillons

congelés devraient être décongelés avant la réalisation du test

et bien mélangés. Ne pas répéter les cycles de congélation-

décongélation. Dans les cas où les échantillons doivent être

expédiés, s'assurer que ceux-ci sont emballés selon les normes

relatives au transport de matières éthologiques.

9. Exécution du test

Amener les tests, les échantillons et/ou les contrôles

externes à température ambiante (15-30°C) avant la

réalisation du test.

1. Retirer la cassette de son emballage d'origine et déposer la

cassette sur une surface plane et propre. Utiliser la cassette

immédiatement après l'ouverture de son emballage.

Indiquer les identifiants du patient et du contrôle sur la

cassette.

2. a) Échantillons de sérum et de

plasma

Tenir la pipette à la verticale et

déposer 1 goutte (env. 25 µl) de

l'échantillon de sérum et de

plasma dans le puits de dépôt (S)

de la cassette.

b) Échantillons de sang total par

ponction veineuse

Tenir la pipette à la verticale et

déposer 2 gouttes (env. 50 μL) de

sang total dans le puits de dépôt

(S) de la cassette.

c) Échantillons de sang total

recueilli au bout du doigt

Remplir le tube capillaire de sang

total d'environ 50 μL de sang. Éviter

la formation de bulles d'air. Déposer

la poire de prélèvement à l'extrémité

du tube capillaire et appuyer sur la

poire pour déposer l'échantillon de

sang total dans le puits de dépôt de la

cassette (S).

3. Tenir la pipette à la verticale et

déposer 1 goutte (55 μL) de la

solution tampon "Buffer".

4. Démarrer le chronomètre.

5. Attendre que la ou les lignes colorées

apparaissent. Interpréter les résultats

après 5 minutes. Ne plus interpréter

les résultats après 10 minutes.

10. Interprétation des résultats

Positif

Deux lignes colorées apparaissent sur la

membrane. Une ligne apparaît à hauteur

de la zone de contrôle (C) et une autre

ligne apparaît à hauteur de la zone de

test (T).

NOTE:

L'intensité de la couleur de la ligne de test (T) peut varier selon

la concentration en anticorps anti-EBV contenue dans

l'échantillon. La moindre apparition d'une ligne colorée à

hauteur de la zone de test (T) doit être considérée comme un

résultat positif.

Négatif

Une ligne colorée apparaît au niveau de

la zone de contrôle (C). Aucune ligne de

couleur n'apparaît au niveau de la zone

de test (T).

Non-valide

Aucune ligne n’apparaît à hauteur de la

zone de contrôle (C). Les tests sur

lesquels aucune ligne de contrôle n'est

apparue dans le temps d'évaluation fixé

doivent être jetés. Contrôler la

procédure d'exécution du test et répéter

le test avec une nouvelle cassette. Dans

le cas où le problème persiste, ne plus

utiliser le kit du test et contacter le

distributeur.

Un volume d'échantillon insuffisant, une mauvaise

manipulation ou des tests périmés sont les principales causes

d'absence de ligne de contrôle.

11. Contrôle qualité

La cassette contient une procédure de contrôle interne.

La ligne colorée apparaissant au niveau de la zone de contrôle

(C) est considérée comme un contrôle interne. Cette ligne

confirme que le volume d'échantillon était suffisant, que la

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manipulation a été correctement effectuée et que la

membrane a été suffisamment imbibée.

Les Bonnes Pratiques de Laboratoire (BPL) recommandent

l'utilisation de matériel de contrôle afin de confirmer la

fiabilité du test.

Contrôle externe de qualité

1. Tenir le flacon à la verticale et déposer 1 goutte (40 µl) de

la solution de contrôle positive ou négative dans le puits de

dépôt (S) de la cassette. Ajouter 1 goutte (env. 55 µl) de

solution tampon.

2. Continuer avec l'étape 4 de l'exécution du test.

3. Ne pas exploiter les résultats du test si les contrôles ne

fournissent pas les résultats attendus. Recommencer le test

ou contacter le distributeur.

12. Limites du test

Le test rapide NADAL® Mononucleosis est réservé au

diagnostic in-vitro professionnel. Le test est réservé à la

détection d’anticorps anti-EBV dans les échantillons de sang

total, de sérum ou de plasma. Ce test qualitatif ne donne

aucune information sur la concentration ou la progression

de la concentration en anticorps anti-EBV.

Le test NADAL® Mononucleosis indique seulement la

présence d'anticorps anti-EBV dans les échantillons et ne

devraient pas être le seul critère lors du diagnostic d'une

infection à la mononucléose.

Un diagnostic clinique définitif ne devrait jamais s'appuyer

sur les résultats d'un seul test. Le diagnostic devrait être

établi par un médecin après évaluation de toutes les

données de laboratoire et cliniques.

Si les résultats du test sont négatifs mais que les

symptômes cliniques persistent, il est recommandé de faire

appel à d'autres méthodes cliniques de diagnostic. Un

résultat négatif n'exclut pas la possibilité d'une infection à

MNI.

13. Résultats attendus

Pendant l'adolescence ou au début de l'âge adulte, le virus

Epstein-Barr provoque une mononucléose infectieuse dans

35-5 à 50% des cas rapportés.

1,5

Aux États-Unis, le taux d'incidence de la mononucléose

infectieuse associée à l'EBV a été estimé à 45 nouveaux cas

pour 100 000 personnes par an et est le plus fort chez les

adolescents ou les jeunes adultes, autour de 2 nouveaux cas

pour 1000 personnes par an. L'infection à l'EBV n'est pas

saisonnière. Le temps d'incubation est de 10 à 60 jours voire

de 7 à 14 jours chez les enfants et les adolescents.

14. Performance du test

Sensibilité

La performance du test NADAL® Mononucleosis a été calculée

en testant des échantillons positifs et négatifs confirmés par

une méthode d'agglutination sur lame disponible dans le

commerce. Les résultats ont montré que la sensibilité du test

NADAL® Mononucleosis est de 99,9% en comparaison avec un

test d’agglutination sur lame.

Spécificité

Le test NADAL® Mononucleosis utilise des antigènes

hautement spécifiques aux anticorps anti-EBV dans le sang

total, le sérum et le plasma. Les résultats ont montré que la

spécificité du test NADAL® Mononucleosis est de 98,9% en

comparaison avec un test d’agglutination sur lame.

NADAL® Mononucleosis vs. Agglutination sur lame

Agglutination sur lame

NADAL®

Mononucleosis

Positif Négatif Total

Positif 60 1 61

Négatif 0 89 89

Total 60 90 150

Sensibilité relative: >99,9% (95,1% - 100%)*

Spécificité relative: 98,9% (94% - 99,9%)*

Concordance générale: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Intervalle de confiance

Substances interférentes

Les analytes suivants ont été ajoutés à des échantillons de

plasma et de sérum négatifs et moyennement positifs

(confirmés avec ELISA) aux concentrations indiquées. Le test a

été réalisé trois fois.

Analytes Concentration

Acide ascorbique 20 mg/ml

Hémoglobine 1000 mg/dl

Acide gentisique 20 mg/dL

Acide oxalique 60 mg/dl

Bilirubine 1000 mg/dl

Acide urique 20 mg/ml

Acétaminophène 20 mg/dL

Acide acétylsalicylique 20 mg/dL

Méthanol 10%

Créatine 200 mg/dL

Albumine 2000 mg/dL

Cofféine 20 mg/dL

Les analytes n'ont montré aucune interférence avec le test

NADAL® Mononucleosis. Aucune différence notable n'a été

observée entre les résultats des trois lots de test.

Précision

Variabilité inter- et intra-lots

Le test NADAL® Mononucleosis a été testé sur trois lots

indépendants dix fois avec des échantillons négatifs,

faiblement, moyennement et fortement positifs sur des

échantillons de sérum et de plasma. Tous les résultats ont été

correctement identifiés. Aucun résultat incohérent n'a été

observé.

Réactions croisées

Les échantillons positifs aux substances suivantes ont été

testés avec le test NADAL® Mononucleosis:

RF HCV

HBsAg TB

HBeAg VIH

HBeAb Syphilis

HBcAb

Aucune réaction croisée n'a été observée. Le test NADAL®

Mononucleosis est hautement spécifique aux anticorps

hétérophiles humains anti-EBV.

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15. Bibliographie

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

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4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 PF

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1. Uso previsto

El test NADAL® Mononucleosis es un inmunoensayo cromato-

gráfico rápido para la detección cualitativa de anticuerpos

heterófilos del virus de Epstein-Barr (VEB) en sangre completa,

suero o plasma humanos. Este test sirve para ayudar en el

diagnóstico de la mononucleosis infecciosa (MI) y solo está

indicado para el uso profesional.

2. Introducción y significado clínico

La mononucleosis infecciosa (MI) está causada por el virus

Epstein-Barr (VEB), que forma parte de la familia del virus

herpes. Los síntomas de la MI son: fiebre, dolor de garganta y

ganglios linfáticos inflamados. En casos muy raros, pueden

producirse problemas en el corazón o en el sistema nervioso

central. El diagnóstico de la MI se determina en base a la

presencia de anticuerpos heterófilos anti-VEB. Estos

anticuerpos pertenecen al tipo IgM. Están presentes en el 80-

90% de los casos de MI aguda y se pueden detectar en el 60-

70% de los pacientes durante la primera semana de la

enfermedad clínica.

1,2,3,4

El test NADAL® Mononucleosis es un test simple que utiliza un

extracto de eritrocitos bovinos para detectar, cualitativa y

selectivamente, anticuerpos heterófilos anti-VEB en sangre

completa, suero o plasma en cuestión de minutos.

3. Principio del test

El test NADAL® Mononucleosis es un inmunoensayo de flujo

lateral para la detección cualitativa de anticuerpos heterófilos

del virus de Epstein-Barr (VEB) en sangre completa, suero o

plasma.

En este test, los antígenos extraídos de eritrocitos bovinos se

encuentran inmovilizados en la región de la línea de test del

casete. Durante la prueba, la muestra reacciona con otros

antígenos extraídos de eritrocitos bovinos que recubren

partículas aplicadas en la almohadilla de conjugado. La mezcla

migra cromatográficamente a lo largo de la membrana e

interactúa con los antígenos inmovilizados. Si la muestra

contiene anticuerpos heterófilos anti-VEB, aparecerá una línea

coloreada en la región de test, indicando un resultado

positivo. Si la muestra no contiene anticuerpos heterófilos

anti-VEB, no aparecerá la línea coloreada en la región de test,

lo que indicará un resultado negativo.

Como control del procedimiento, debe aparecer siempre una

línea coloreada en la región de control (C), indicando que el

volumen de muestra ha sido adecuado y que la membrana se

ha empapado suficientemente.

4. Reactivos y materiales provistos

5 casetes de test NADAL® Mononucleosis con pipetas

desechables incluidas

1 búfer

1 control positivo (plasma humano diluido que contiene

anticuerpos heterófilos anti-VEB, azida de sodio al 0,09%)

1 control negativo (plasma humano diluido, azida de sodio

al 0,09%)

1 manual de instrucciones

5. Materiales adicionales

Recipientes para recolectar la muestra

Centrifugadora (para suero/plasma)

Cronómetro

Lanceta (solo para sangre completa obtenida por punción

digital)

Tubos capilares desechables heparinizados y goteros

dispensadores (solo para sangre completa obtenida por

punción digital), si fueran necesarios.

6. Almacenamiento y conservación

Almacene el kit de test a 2-30 °C y utilícelo antes de la fecha

de caducidad impresa en el envase. Los casetes de test se

mantienen estables hasta la fecha de caducidad indicada.

Manténgalos en su envase sellado hasta su uso. No congele el

kit. No utilice los test después de su fecha de caducidad.

7. Advertencias y precauciones

Solo apto para el uso profesional de diagnóstico in-vitro.

Lea atentamente todo el procedimiento del test antes de

comenzar la prueba.

No utilice el test después de la fecha de caducidad indicada

en el envase.

No utilice el kit de test si el envase está dañado.

No reutilice los dispositivos.

No añada muestras en el área de reacción (región de

resultados).

Evite tocar el área de reacción (región de resultados) para

evitar posibles contaminaciones.

Evite la contaminación cruzada de las muestras utilizando

un nuevo recipiente recolector para cada una.

No coma, beba o fume en la zona donde se manipulan de

las muestras y los kits de test.

Utilice ropa protectora, como bata de laboratorio, guantes

desechables y gafas de protección, mientras manipule las

muestras.

Manipule las muestras como si contuviesen agentes

infecciosos. Siga durante todo el procedimiento las

precauciones establecidas para riesgos microbiológicos, y

las directrices estándar para la correcta eliminación de las

muestras.

El kit de test contiene productos de origen animal. El

conocimiento certificado del origen y/o estado sanitario de

los animales no garantiza completamente la ausencia de

agentes patogénicos transmisibles. Por eso, se recomienda

tratar estos productos como potencialmente infecciosos y

seguir las medidas de seguridad habituales durante su

manipulación (p.ej. no ingerir ni inhalar).

La humedad y la temperatura pueden afectar

negativamente a los resultados del test.

La eliminación de los materiales utilizados debe realizarse

de acuerdo con las regulaciones locales.

8. Recolección de muestras y preparación

El test NADAL® Mononucleosis se puede realizar utilizando

sangre completa (obtenida por punción venosa o digital),

suero o plasma.

Para recolectar muestras de sangre completa por punción

venosa:

Recolecte las muestras de sangre con anticoagulantes (sodio o

heparina de litio, potasio o EDTA de sodio, oxalato de sodio,

citrato de sodio) siguiendo los procedimientos estándar de

laboratorio.

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Para recolectar muestras de sangre completa por punción

digital:

 Lave la mano del paciente con jabón y agua templada o

límpiela con un hisopo con alcohol. Déjela secar.

 Masajee la mano, sin tocar el lugar de la punción,

frotándola hacia a la punta del dedo medio o anular.

 Pinche la piel con una lanceta estéril. Limpie la primera gota

de sangre.

 Frote suavemente la mano desde la muñeca hacia la palma

y hasta la punta del dedo de modo que se forme una gota

redonda de sangre en la zona de punción.

Separe el suero o plasma de la sangre lo antes posible para

evitar la hemólisis. Utilice solo muestras claras no

hemolizadas.

El test se debe realizar inmediatamente después de la

recolección de la muestra. No deje las muestras a temperatura

ambiente durante periodos de tiempo prolongados. Las

muestras de suero y plasma se pueden almacenar a 2-8 °C

hasta 3 días. Para un almacenamiento de larga duración, debe

conservarlas por debajo de -20 °C. La sangre completa

recolectada por punción venosa se debe almacenar a 2-8 °C

siempre que el test se realice en los 2 días siguientes a la

recolección. No congele las muestras de sangre completa. Si la

sangre completa se ha obtenido por punción digital se debe

realizar la prueba inmediatamente. Lleve las muestras a

temperatura ambiente antes de realizar la prueba. Las

muestras congeladas deben ser completamente descon-

geladas y mezcladas bien antes de realizar la prueba. Evite los

ciclos repetidos de congelado y descongelado. Si las muestras

se van a transportar, se deben empaquetar de acuerdo con las

regulaciones vigentes para el transporte de agentes

etiológicos.

9. Procedimiento del test

Lleve los test, búfer, muestras y/o controles a temperatura

ambiente (15-30 °C) antes de realizar la prueba.

1. Retire el casete de test de su envase sellado y colóquelo

sobre una superficie limpia y plana. El casete se debe

utilizar inmediatamente después de abrir el envase de

aluminio. Etiquételo con la identificación del paciente o del

control.

2. a) Para muestras de suero o

plasma:

Sujetando la pipeta verticalmente,

añada 1 gota (aprox. 25 μL) de suero

o plasma al pocillo del casete (S).

b) Para muestras de sangre

completa obtenidas por punción

venosa:

Sujetando la pipeta verticalmente,

añada 2 gotas (aprox. 50 μL) de

sangre completa al pocillo del

casete (S).

c) Para muestras de sangre

completa obtenidas por punción

digital:

Coloque el extremo del tubo capilar

sobre la sangre hasta llenarlo con

aproximadamente 50 µL. Evite la

formación de burbujas. Coloque la

perilla en el extremo del tubo

capilar y apriétela para dispensar la

muestra de sangre completa en el

pocillo del casete (S).

3. Sosteniendo el botecito de búfer

verticalmente añada 1 gota (aprox.

55 μL) de búfer al pocillo del casete

(S).

4. Active el cronómetro.

5. Espere a que aparezca(n) la(s) línea(s)

coloreada(s). Lea los resultados del

test tras 5 minutos. No interprete los

resultados pasados más de 10

minutos.

10. Interpretación del resultado

Positivo:

Aparecen dos líneas coloreadas en la

membrana. Una en la región de la línea de

control (C) y la otra en la región de la línea

de test (T).

Nota:

La intensidad del color en la región de la línea de test (T)

puede variar en función de la concentración de anticuerpos

anti-VEB presentes en la muestra. Por eso, cualquier sombra

coloreada en la región de test (T) se debe considerar positiva.

Negativo:

Aparece una línea coloreada en la región de

la línea de control (C). No aparece ninguna

línea coloreada en la región de la línea de

test (T).

No válido:

No aparece la línea de control (C). Si no

aparece la línea de control dentro del

tiempo de lectura especificado, los

resultados del test se deben descartar.

Revise el procedimiento y repita la prueba

con un nuevo test. Si el problema persiste,

deje de usar el kit inmediatamente y

contacte con su distribuidor.

Las causas más frecuentes de que no aparezca la línea de

control son un volumen de muestra insuficiente, un

procedimiento incorrecto o que el dispositivo esté caducado.

11. Control de calidad

El casete de test contiene un control interno del procedi-

miento.

La línea coloreada que aparece en la región de control (C) se

considera un control interno del procedimiento. Esta línea

confirma que el volumen de la muestra ha sido el adecuado,

que la membrana se ha empapado suficientemente y que la

técnica del procedimiento ha sido correcta.

Las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) recomiendan el uso

de materiales de control para asegurar que el funcionamiento

del test es correcto.

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Procedimiento operativo para el análisis del control de

calidad externo

1. Sostenga cada bote en posición vertical, añada 1 gota

(aprox. 40 μL) de solución de control positivo o negativo en

el pocillo del casete (S). A continuación, sosteniendo el

botecito en posición vertical, añada 1 gota (aprox. 55 μL) de

búfer al pocillo del casete (S).

2. Continúe con el paso 4 del 'Procedimiento de test'.

3. Si los controles no producen los resultados esperados, no

utilice los resultados obtenidos. Repita el test o contacte

con su distribuidor.

12. Limitaciones

El test NADAL® Mononucleosis solo es apto para el uso de

diagnóstico in-vitro. El test se debe utilizar únicamente para

la detección de anticuerpos anti-VEB en muestras de sangre

completa, suero o plasma. Este test cualitativo no detecta ni

la cantidad ni el aumento de la concentración de

anticuerpos anti-VEB.

El test NADAL® Mononucleosis solo detecta la presencia de

anticuerpos anti-VEB en la muestra y no se debe utilizar

como único criterio para el diagnóstico de una infección por

mononucleosis.

Al igual que con todos los test de diagnóstico, los resultados

obtenidos se deben interpretar junto con otra información

clínica disponible por el médico.

Si el test muestra un resultado negativo y los síntomas

clínicos persisten, se recomienda realizar pruebas

adicionales utilizando otros métodos clínicos. Un resultado

negativo no excluye la posibilidad de infección por MI.

13. Resultados esperados

La infección con el virus de Epstein-Barr (VEB) en adolescentes

o adultos jóvenes causa mononucleosis infecciosa (MI) en el

35-50% de los casos notificados.

1,5

La incidencia de MI

asociada a VEB en los EE.UU. se ha estimado en 45 por

100.000 y es la más alta en adolescentes y adultos jóvenes,

aproximadamente 2 de cada 1.000. No existe un patrón

estacional para la infección por VEB. El periodo de incubación

es de 10 a 60 días, mientras que en niños y adolescentes es

habitualmente de 7 a 14 días.

14. Características del rendimiento

Sensibilidad

Se ha evaluado el test NADAL® Mononucleosis con muestras

confirmadas positivas o negativas por un test de aglutinación

en portaobjetos disponible comercialmente. El test de

aglutinación en portaobjetos sirvió como método de

referencia para el test NADAL® Mononucleosis. El resultado

muestra que la sensibilidad del test NADAL® Mononucleosis es

>99,9% en relación al test de aglutinación en portaobjetos.

Especificidad

El test NADAL® Mononucleosis utiliza antígenos altamente

específicos para los anticuerpos anti-VEB en sangre completa,

suero o plasma. Los resultados muestran que la especificidad

del test NADAL® Mononucleosis es 98,9% en relación al test

de aglutinación en portaobjetos.

Test NADAL® Mononucleosis frente a test de aglutinación en

portaobjetos.

Test de aglutinación en

portaobjetos

Test NADAL®

Mononucleosis

Positivo Negativo Total

Positivo 60 1 61

Negativo 0 89 89

Total 60 90 150

Sensibilidad relativa: >99,9% (95,1% - 100%)*

Especificidad relativa: 98,9% (94% - 99,9%)*

Concordancia general: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% intervalo de confianza

Sustancias interferentes

Se añadieron los siguientes analitos a las concentraciones

indicadas a muestras de plasma y suero negativas y

medianamente positivas (confirmadas con ELISA) y se

analizaron por triplicado.

Analito Concentración

Ácido ascórbico 20 mg/mL

Hemoglobina 1000 mg/dL

Ácido gentísico 20 mg/dL

Ácido oxálico 60 mg/dL

Bilirrubina 1000 mg/dL

Ácido úrico 20 mg/mL

Acetaminofeno 20 mg/dL

Ácido acetilsalicílico 20 mg/dL

Metanol 10%

Creatina 200 mg/dL

Albúmina 2000 mg/dL

Cafeína 20 mg/dL

Los analitos no mostraron ninguna interferencia con el test

NADAL® Mononucleosis. No hubo diferencias evidentes entre

los resultados obtenidos con tres lotes de test.

Precisión

Variabilidad interlote e intralote

Se analizaron tres lotes independientes de test NADAL®

Mononucleosis con muestras de suero y plasma negativas así

como débilmente, medianamente y altamente positivas en

determinaciones de 10 veces. Todos los resultados cumplieron

con las expectativas. No se obtuvieron resultados divergentes

dentro de las determinaciones de 10 veces o entre los

diferentes lotes.

Reacciones cruzadas

Se analizaron las muestras positivas para los siguientes

parámetros con el test NADAL® Mononucleosis:

FR VHC

HBsAg TB

HBeAg VIH

HBeAb Sífilis

HBcAb

No se observaron reacciones cruzadas, lo cual indica que el

test NADAL® Mononucleosis tiene un alto grado de

especificidad con los anticuerpos anti-VEB humanos.

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15. Referencias

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 GP

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1. Scopo del test

Il Test rapido NADAL® Mononucleosis è un immunodosaggio

cromatografico per l`individuazione qualitativa degli anticorpi

eterofili del virus di Epstein-Barr (EBV) in campioni di sangue

intero, siero oppure plasma. Il test è concepito come supporto

nella diagnosi di una Mononucleosi infettiva (IM) e solo per

uso professionale.

2. Introduzione e Significato Clinico

La Mononucleosi Infettiva (IM) è causata dal virus di Epstein-

Barr (EBV), membro della famiglia dei virus herpes. I sintomi

dell`IM sono: febbre, gola irritata e ghiandole linfatiche

ingrossate. Raramente, possono verificarsi anche problemi del

sistema nervoso centrale oppure cardiaci. La diagnosi di IM è

fatta basandosi sulla presenza di anticorpi eterofili anti-EBV.

Gli anticorpi eterofili anti-EBV appartengono alla classe degli

IgM. Sono presenti nell`80-90% dei casi acuti di IM e possono

essere rilevati nel 60-70% dei pazienti durante la prima

settimana di malattia clinica.

1,2,3,4

Il Test NADAL® Mononucleosis è un test semplice che utilizza

un estratto di eritrociti bovini per individuare qualitativa-

mente e selettivamente gli anticorpi eterofili anti-EBV in

campioni di sangue intero, siero oppure plasma in pochi

minuti.

3. Principio del Test

Il Test NADAL® Mononucleosis è un immunodosaggio a flusso

laterale per l`individuazione qualitativa degli anticorpi eterofili

del virus di Epstein-Barr (EBV) in campioni di sangue intero,

siero oppure plasma.

In questo test, gli antigeni estratti dagli eritrociti bovini sono

immobilizzati nella regione della linea del test (T) del test a

cassetta. Durante il test, il campione reagisce con altri antigeni

estratti dagli eritrociti bovini che rivestono le particelle

applicate sul tampone coniugato. Il complesso migra

cromatograficamente lungo la membrana interagendo con gli

antigeni immobilizzati. Se il campione contiene anticorpi

eterofili anti-EBV, compare una linea colorata nella regione

della linea del test (T), indicando un risultato positivo. Se il

campione non contiene anticorpi eterofili anti-EBV, non

compare alcuna linea nella regione della linea del test,

indicando un risultato negativo.

Una linea colorata dovrebbe sempre comparire nella regione

della linea di controllo (C) fungendo da controllo procedurale

interno. Tale linea indica che è stato aggiunto il giusto volume

di campione e che la migrazione lungo la membrana è

avvenuta correttamente.

4. Reagenti e Matreriali Forniti

5 test a cassetta NADAL® Mononucleosis, pipette monouso

incluse

1 tampone

1 Controllo Positivo (plasma umano diluito contenente

anticorpi eterofili anti-EBV, 0,09% azoturo di sodio)

1 Controllo Negativo (plasma umano diluito, 0,09% azoturo

di sodio)

1 istruzioni per l`uso

5. Altri materiali richiesti

Contenitore di raccolta del campione

Centrifuga (per siero/plasma)

Timer

Bisturi (solo per il prelievo di sangue intero)

Tubicini capillari eparinizzati e pompetta di gomma (solo

per il prelievo di sangue intero)

6. Conservazione e Stabilità

I kit vanno conservati a 2-30°C ed utilizzati prima della data di

scadenza riportata sulla confezione. I test a cassetta

rimangono stabili fino alla data di scadenza riportata sulla

confezione. I test a cassetta vanno conservati nella confezione

fino al loro utilizzo. Non congelare. Non utilizzare i test oltre la

data di scadenza.

7. Avvertenze e Precauzioni

Esclusivamente per uso diagnostico professionale in-vitro.

Leggere attentamente la procedura del test prima di

eseguirlo.

Non utilizzare il test oltre la data di scadenza riportata sulla

confezione.

Non utilizzare il test se la confezione dovesse risultare

danneggiata.

Non riutilizzare i test.

Non aggiungere i campioni all`area di risultato (result area).

Al fine di evitare la contaminazione non toccare l`area di

risultato (result area).

Evitare il rischio di contaminazione incrociata utilizzando

sempre un nuovo contenitore di raccolta per ogni

campione.

Non mangiare, bere o fumare nei luoghi in cui vengono

trattati i campioni ed i test.

Indossare abiti protettivi quali camici da laboratorio, guanti

monouso ed occhiali protettivi quando vengono trattati i

campioni.

Considerare tutti i campioni come potenzialmente infettivi.

Osservare le normali precauzioni contro rischi

microbiologici e seguire le procedure standard per il

corretto smaltimento dei campioni.

Il kit fornito contiene prodotti di origine animale. La

conoscenza certificata della provenienza e/o condizione

sanitaria degli animali non esclude del tutto l`assenza di

agenti patogeni trasmissibili. Si raccomanda, pertanto, che

questi prodotti vengano trattati come potenzialmente

infettivi ed utilizzati nel rispetto delle normali pratiche di

sicurezza (ad esempio, non ingerire o inalare).

Umiditá o temperature elevate possono influenzare in

maniera negativa i risultati del test.

I materiali utilizzati nello svolgimento del test vanno smaltiti

nel rispetto delle regolamentazioni locali.

8. Preparazione e Raccolta del Campione

Il test NADAL® Mononucleosis può essere eseguito su

campioni di sangue intero (ottenuti tramite prelievo venoso o

puntura del polpastrello), siero o plasma.

Campioni di sangue intero, prelievo venoso o puntura del

polpastrello:

Raccogliere i campioni di sangue contenenti anticoagulanti

(sodio o eparina litio, potassio oppure sodio EDTA, ossalato di

sodio, citrato di sodio) seguendo le procedure di laboratorio

standard.

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Campioni di sangue intero, prelievo venoso o puntura del

polpastrello:

 Lavare la mano del paziente con sapone ed acqua calda o

pulire con alcol la zona da incidere. Fare asciugare.

 Massaggiare la mano del paziente senza toccare la zona del

prelievo sfregando la mano verso il basso in direzione del

dito medio o dell`anulare.

 Incidere la punta del dito utilizzando un bisturi sterile.

Asciugare la prima goccia di sangue.

 Sfregare leggermente la mano del paziente dal polso al

palmo fino al dito inciso affinchè si formi una nuova goccia

di sangue.

Separare siero e plasma immediatamente al fine di evitare

emolisi. Utilizzare solo campioni chiari non emolizzati

Eseguire il test immediatamente dopo la raccolta del

campione. Non lasciare il test a temperatura ambiente per

lunghi periodi di tempo. Campioni di siero e plasma possono

essere conservati tra 2-8°C per un massimo di 3 giorni. Per

conservazioni prolungate, i campioni vanno conservati a -20°C.

I campioni di sangue intero raccolti attraverso prelievo venoso

vanno conservati a 2-8°C nel caso in cui il test venga svolto

entro 2 giorni dalla raccolta del campione. Non congelare i

campioni di sangue intero. I campioni di sangue intero raccolti

attraverso puntura del polpastrello, andrebbero testati

immediatamente. Portare i campioni a temperatura ambiente

prima di eseguire il test. I campioni congelati vanno fatti

scongelare completamente e mescolati adeguatamente prima

di eseguire il test. Evitare episodi ripetuti di congelamento e

scongelamento dei campioni. Nel caso in cui si intenda spedire

i campioni, questi andrebbero imballati seguendo le

regolamentazioni locali in materia di trasporto di agenti

eziologici.

9. Procedura del Test

Portare i test, i campioni, soluzioni e/o controlli a

temperatura ambiente (15-30°) prima di eseguire il test.

1. Rimuovere il test a cassetta dalla confezione ed utilizzarlo

nel più breve tempo possibile. Il test a cassetta andrebbe

utilizzato immediatamente dopo l`apertura della

confezione. Etichettare il test a cassetta con l`identificativo

del paziente o controllo.

2. a) Per i campioni di siero o plasma:

Mantenendo il contagocce

verticalmente, aggiungere 1

goccia (circa 25 μL) di siero

oppure plasma nel pozzetto di

raccolta del campione (S) del test

a cassetta.

b) Per campioni di sangue intero

raccolto tramite prelievo venoso:

Mantenendo verticalmente il

contagocce, aggiungere 2 gocce

(circa 50 μL) di sangue intero nel

pozzetto di raccolta del campione

(S) del test a cassetta.

c) Per campioni di sangue intero

prelevato tramite puntura del

polpastrello:

Appoggiare il tubo capillare finchè

non sia riempito di sangue per circa

50 μL. Evitare la formazione di bolle

d`aria. Posizionare la pompetta di

gomma al lato opposto del tubo

capillare e premere per trasferire il

campione di sangue nel pozzetto di

raccolta del campione (S) del test a

cassetta.

3. Mantenendo verticalmente il flacone

di soluzione, aggiungere 1 goccia

(circa 55 μL) di soluzione nel pozzetto

di raccolta del campione (S).

4. Avviare il timer.

5. Attendere la comparsa delle linee

colorate. Leggere il risultato del test

entro 5 minuti. Non interpretare i

risultati dopo più di 10 minuti.

10. Interpretazione dei risultati

Positivo:

Compaiono due linee colorate sulla

membrana. Una linea colorata nella

regione della linea di controllo (C) e una

linea nella regione della linea del test (T).

Nota bene:

L`intensità della linea del test nella regione della linea del test

(T) varia in base alla concentrazione degli anticorpi anti-EBV

presenti nel campione. Pertanto, qualsiasi sfumatura di colore

nell`area della linea del test (T) va considerata come indicativa

di risultato psitivo.

Negativo:

Si sviluppa una linea colorata nella

regione della linea di controllo (C). Non

compare alcuna linea visibile nella

regione della linea del test (T).

Non valido:

La linea di controllo (C) non compare. I

risultati di qualsiasi test che non abbia

prodotto alcuna linea di controllo entro i

tempi di lettura indicati, non vanno presi

in considerazione. In tal caso si consiglia

di rivedere la procedura e ripetere il test

utilizzando un nuovo test a cassetta. Se il

problema persiste, si consiglia di

interrompere immediatamente l`utilizzo

dello stesso lotto di test e contattare il

proprio distributore.

Un volume insufficiente di campione, procedure operative

scorrette o test scaduti sono tra le principali cause che

potrebbero impedire la comparsa della linea di controllo.

11. Controllo Qualità

Un controllo procedurale interno è inserito nel test a cassetta:

La linea colorata che compare in corrispondenza della regione

della linea di controllo (C) è da considerarsi un controllo

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procedurale interno. Ciò conferma che è stato aggiunto il

giusto volume di campione, che la migrazione lungo la

membrana è avvenuta correttamente e che sono state

applicate le corrette tecniche procedurali.

La Buona Pratica di Laboratorio (GLP) raccomanda l`impiego di

metodi di controllo al fine di confermare la corretta

performance del kit di test.

Procedura per l`esecuzione del Controllo Qualità Esterno

1. Mantenendo ogni flacone verticalmente, aggiungere 1

goccia (circa 40 μL) di soluzione controllo positivo oppure

negativo nel pozzetto di raccolta del campione (S) del test a

cassetta. Poi, mantenendo il flacone verticalmente,

aggiungere 1 goccia (circa 55 μL) di soluzione nel pozzetto

di raccolta del campione (S).

2. Continuare con il passaggio 4 "Procedura del Test".

3. Se i controlli non mostrano i risultati attesi, non utilizzare i

risultati ottenuti. Ripetere il test o contattare il proprio

distributore.

12. Limiti del Test

Il test NADAL® Mononucleosis è un test per uso diagnostico

professionale in-vitro. Il test può essere utilizzato per la

rilevazione degli anticorpi anti-EBV in campioni di sangue

intero, siero oppure plasma. In ogni caso, nè il valore

quantitativo nè il grado di aumento della concentrazione

degli anticorpi anti-EBV possono essere determinati con

questo test qualitativo.

Il test NADAL® Mononucleosis rileva solo gli anticorpi anti-

EBV nel campione e non va utilizzato come unico criterio

per la diagnosi di infezioni da mononucleosi infettiva.

Come per tutti i test diagnostici, tutti i risultati ottenuti

andrebbero interpretati in congiunzione con altre

informazioni cliniche reperibili dal medico.

Se il risultato del test è negativo ma i sintomi clinici

persistono, si consiglia di eseguire altri test utilizzando altri

metodi clinici di analisi. Un risultato negativo non preclude

la possibilità di infezioni da IM.

13. Risultati attesi

Le infezioni causate dal virus di Epstein-Barr (EBV) contratte

durante l`adolescenza o la giovane età adulta portano allo

sviluppo di Mononucleosi infettiva (IM) nel 35%- 50% dei casi

riportati.

1,5

L`incidenza dell`IM associata all`EBV negli USA è

stata stimata al 45 per 100,000. Raggiunge il picco negli

adolescenti e giovani adulti - circa 2 su 1000. Non esistono

legami stagionali con l`incidenza delle infezioni EBV. Il periodo

di incubazione varia tra 10 e 60 giorni, anche se un periodo di

incubazione tra i 7 e i 14 giorni è comune per i bambini e gli

adolescenti.

14. Caratteristiche Tecniche

Sensibilità

Il test NADAL® Mononucleosis è stato valutato con campioni

confermati positivi o negativi utilizzando un test di

agglutinazione su vetrino normalmente reperibile in

commercio. Il test di agglutinazione su vetrino serve come

metodo di riferimento per il test NADAL® Mononucleosis. Il

risultato mostra che la sensibilità del Test NADAL®

Mononucleosis è >99,9% in base al test di agglutinazione su

vetrino.

Specificità

Il Test NADAL® Mononucleosis utilizza antigeni altamente

specifici per glianticorpi anti-EBV in campioni di sangue intero,

siero oppure plasma. I risultati mostrano che la specificità del

Test NADAL® Mononucleosis è del 98,9% in relazione al Test

di agglutinazione su vetrino.

Test NADAL® Mononucleosis vs. Test di agglutinazione su

vetrino

Test di agglutinazione su vetrino

Test NADAL®

Mononucleosis

Positivo Negativo Totale

Positivo 60 1 61

Negativo 0 89 89

Totale 60 90 150

Sensibilità Relativa: >99,9% (95,1% - 100%)*

Specificità Relativa: 98,9% (94% - 99,9%)*

Andamento complessivo: 99,3% (96,3% - 99,9%)*

*95% Accuratezza

Sostanze interferenti

I campioni di plasma e siero negativi e medio positivi

(confermati ELISA) sono stati adulterati con gli analiti alle

concentrazioni riportate sotto ed analizzati in ripetizioni da

tre.

Analita Concentrazione

Acido Ascorbico 20 mg/ml

Emoglobina 1000 mg/dl

Acido Gentisico 20 mg/dl

Acido Ossalico 60 mg/dl

Bilirubina 1000 mg/dl

Acido Urico 20 mg/ml

Acetaminofene 20 mg/dl

Acido Acetilsalicilico 20 mg/dl

Metanolo 10%

Creatina 200 mg/dl

Albumina 2000 mg/dl

Caffeina 20 mg/dl

Gli analiti non hanno mostrato alcuna interferenza con il Test

NADAL® Mononucleosis. Non c`erano differenze evidenti tra i

risultati ottenuti con questi tre lotti di test.

Precisione

Variabilità inter ed intra-lotto

Sono stati analizzati tre lotti indipendenti del Test NADAL®

Mononucleosis con campioni di siero e plasma bassi, medi e

alti positivi e negativi in 10 ripetizioni. Tutti i risultati

corrispondono alle aspettative. Non sono stati ottenuti

risultati discostanti nè tra le 10 ripetizioni nè tra i differenti

lotti.

Reattività incrociata

I campioni positivi ai seguenti parametri sono stati analizzati

con il Test NADAL® Mononucleosis:

RF HCV

HBsAg TB

HBeAg HIV

HBeAb Sifilide

HBcAb

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Non è stata riscontrata alcuna reattività incrociata indicando

che il Test NADAL® Mononucleosis ha un elevato grado di

specificità per glianticorpi anti-EBV.

15. Bibliografía

1. Hickey SM, Strasburger VC. What Every Pediatrician Should Know About Infectious

Mononucleosis In Adolescents. Pediatr Clin North Am. 1997;44(6):1541-56.

2. Omori M. Mononucleosis http://www.emedicine.com/EMERG/topic309.htm

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr-Virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl.

1996; 100:83-8.

4. Papesch M, Watkins R. Epstein-Barr-Virus infectious mononucleosis. Clin

Otolaryngol. 2001; 26(1):3-8.

5. CDC National Center for Infectious Diseases. EBV & IM:

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm

Rev. 1, 2019-07-04 BN

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